[发明专利]用于水果黄瓜绿美1号种子纯度鉴定的SSR引物及方法

说明书

本发明公开了一种用于鉴定水果黄瓜绿美1号种子纯度的SSR引物SSR17922，其中上游引物SSR17922‑F为：5'‑CATTCTAGGTCAATGAATCGCA‑3'，下游引物SSR17922‑R为：5'‑GCAAAGTTGCCACATTGAAG‑3'。通过上述引物，能够准确、快速的鉴定杂交种绿美1号种子纯度。与传统田间小区鉴定相比，在父母本中分别扩增出两条特异的清晰带型，母本中扩增出182bp的条带，父本中扩增出197bp的条带，而在F1品种绿美1号中扩增出同时含有父母本特异带型的182/197bp杂合条带，且条带清晰，遗传性稳定，可将水果黄瓜绿美1号与其父母本种子、其他混杂种子区分开来，快速检测出杂交种绿美1号的种子纯度。避免了传统田间小区鉴定周期长、费时费工、占地面积大等的不足，能够替代传统杂交种子纯度鉴定的方法，大大缩短鉴定时间，节省鉴定成本，提高鉴定准确度，具有较强的商业应用价值。

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体涉及一种用于水果黄瓜杂交种“绿美1号”种子纯度鉴定的SSR标记。

背景技术

黄瓜（CucumissativusL.）是葫芦科（Cucurbitaceae）甜瓜属（CucumisL.）一年生草本攀援植物，在我国已有2000 多年的栽培历史，是世界主要蔬菜作物之一，在蔬菜生产中占有重要的地位。黄瓜具有较强的杂种优势，目前市场上广泛利用的均为杂种一代种子。黄瓜育种工作者培育出许多高产、优质、抗病的优良品种，为农业增产、稳产做出了巨大的贡献。但由于制种技术、机械混杂形成的假杂种、社会上一些不法商贩为追求经济利益购销的假冒伪劣种子，严重影响了黄瓜的产量、品质，不但不能达到增产目的，甚至会导致减产，给国家和农民造成了重大经济损失。因此，开展快速、准确鉴定黄瓜种子纯度方法的研究具有重要意义。

种子纯度是种子质量标准的首要指标，也是保证种子质量的关键。近年来，随着分子技术的发展，DNA 分子标记技术日趋完善，广泛用于农作物和蔬菜种子的真实性检测和纯度鉴定。其中，SSR( simple sequence repeat) 标记因具有数量丰富、多态性高、操作简便、结果稳定可靠等优点，成为当前最经济、最有效的分子标记技术，也为种子纯度鉴定提供了一种更为快速、高效、简便、可靠的方法。

绿美1号为本公司（江苏绿港现代农业发展有限公司）自主研发的一代杂交种，拥有完全自主知识产权的新品种，是以“C87”为母本，“C91”为父本育成的早熟水果黄瓜。该品种植株长势旺盛，瓜条顺直，节节有瓜，瓜长14-16cm ，单瓜重130g左右。近年来，水果黄瓜绿美1号作为无土栽培中的主要品种，因其色泽深亮、口感鲜嫩、高产等优良农艺性状，栽培面积逐年扩大。因此，开发出能快速、高效鉴定绿美1号种子纯度的SSR分子标记技术，将保证该优良品种的经济效益最大化，具有较高的商业应用前景。

发明内容

本发明针对目前黄瓜杂交种子纯度鉴定靠田间表型观察方法存在受环境影响大、鉴定时间长等缺陷，本发明的目的在于提供一种用于鉴定黄瓜杂交种绿美1号种子纯度的SSR 引物，该引物能够在对应父母本中产生特异性标记，特异性强，能够快速、准确、高效的鉴定黄瓜杂交种绿美1号种子纯度。

本发明所采用的技术方案是：

一种用于鉴定水果黄瓜绿美1号种子纯度的SSR引物SSR17922，所述引物包括上游引物SSR17922-F和下游引物SSR17922-R，其中

上游引物SSR17922-F为：5'- CATTCTAGGTCAATGAATCGCA -3'，

下游引物SSR17922-R为：5'- GCAAAGTTGCCACATTGAAG -3' 。

一种采用上述引物SSR17922检测水果黄瓜绿美1号种子纯度的方法，包括以下步骤：