[发明专利]一种半抗原及其在检测雷公藤乙素和雷公藤甲素方面的应用

权利要求书

1.一种半抗原，其特征在于，具有如下结构：

2.权利要求1所述的半抗原的制备方法，其特征在于，反应路径如下：

具体为：将雷公藤乙素与琥珀酸酐在55～65℃下反应得到。

3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述反应在吡啶中进行；

所述雷公藤乙素与所述琥珀酸酐的质量比为10：(3～5)；

所述反应在避光条件下进行；

所述反应在220～260rpm下进行7～9h。

4.根据权利要求2或3所述的制备方法，其特征在于，在所述反应后，还包括纯化过程，所述纯化过程具体为：用乙酸乙酯萃取反应产物后，用稀盐酸洗涤有机相，在有机相干燥浓缩后，经C18色谱柱分离纯化，即得。

5.一种人工抗原，其特征在于，由权利要求1所述的半抗原与载体蛋白偶联后得到；

其中，所述载体蛋白选自牛血清白蛋白、卵清蛋白、钥孔血蓝蛋白、甲状腺蛋白、人血清白蛋白中的一种或几种。

6.权利要求5所述的人工抗原的制备方法，其特征在于，通过碳二亚胺、活泼酯法或混合酸酐法使所述半抗原与载体蛋白偶联。

7.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于，包括：

(1)称取摩尔比为1：(1.8～2.2)：(1.8～2.2)的所述半抗原、N-羟基琥珀酰亚胺和二环己基碳二亚胺，用N,N-二甲基甲酰胺溶解后得到反应液，将所述反应液在350～400rpm下室温避光反应4～6h，离心取上清，获得半抗原活化液；

按终浓度为4.5～5.5mg/mL将所述载体蛋白溶于磷酸盐缓冲液中，得到载体蛋白溶液；

(2)将所述半抗原活化液滴入所述载体蛋白溶液中，使所述半抗原与载体蛋白的摩尔比达到(18～22):1，4℃搅拌反应过夜。

8.一种多克隆抗体，其特征在于，以权利要求5所述的人工抗原为免疫原，免疫动物制备得到。

9.权利要求1所述的半抗原或权利要求5所述的人工抗原在以下任一方面的应用：

①在制备抗雷公藤乙素和雷公藤甲素特异性抗体中的应用；

②在制备检测抗雷公藤乙素和雷公藤甲素特异性抗体的试剂中的应用。

10.权利要求8所述的多克隆抗体在以下任一方面的应用：

(1)在制备检测雷公藤乙素和雷公藤甲素药物的试剂中的应用；

(2)在制备雷公藤乙素和雷公藤甲素的免疫层析试纸条中的应用；

(3)在制备雷公藤乙素和雷公藤甲素的酶联免疫分析试剂盒中的应用；

(4)在检测有毒蜂蜜中的应用。