[发明专利]检测胎盘素里黄体酮和雌酮两种激素的方法有效
申请号: | 202010247208.9 | 申请日: | 2020-03-31 |
公开(公告)号: | CN111474133B | 公开(公告)日: | 2023-06-06 |
发明(设计)人: | 邵咏妮;王雨田;彭滟;朱亦鸣;庄松林 | 申请(专利权)人: | 上海理工大学 |
主分类号: | G01N21/3577 | 分类号: | G01N21/3577 |
代理公司: | 上海邦德专利代理事务所(普通合伙) 31312 | 代理人: | 余昌昊 |
地址: | 200093 *** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 检测 胎盘 黄体酮 雌酮两种 激素 方法 | ||
1.一种检测胎盘素里黄体酮和雌酮两种激素的方法,其特征在于,该方法包括:
(1)利用傅里叶红外光谱仪获得胎盘素针剂样本溶液的远红外及太赫兹波段光谱;
(2)利用傅里叶红外光谱仪获得黄体酮、雌酮标准品的光谱,并对比步骤(1)获取的胎盘素光谱,找到两种标准品与胎盘素对应的吸收峰频率;
(3)将胎盘素针剂溶液稀释至浓度为100%,90%,80%,70%,60%,50%,40%,30%,20%九个浓度共计九个样本,每个样本准备两份;
(4)将其中一组样品利用傅里叶红外光谱仪来检测不同浓度胎盘素溶液的光谱图;
(5)将另一组样品利用高效液相色谱法检测不同浓度胎盘素溶液中黄体酮激素和雌酮激素的含量;
(6)将不同浓度胎盘素溶液光谱图对应两种激素的吸收峰面积的数据与对应两种激素的含量真实值进行偏最小二乘法模型的建立,得到基于谱峰的峰面积的激素含量预测模型;
对获得的光谱数据还包括:用matlab进行去趋势与平滑预处理的步骤以及使用UnscramblerX软件对所得数据进行基线矫正的步骤;
所述步骤(5)中,高效液相色谱法采用色谱柱AgilentC18,流动相采用乙腈-水等梯度洗脱,流速1.0mL/min,检测波长225nm,柱温30℃,进样量10μL;
所述步骤(6)中,使用偏最小二乘法进行预测模型得到的黄体酮激素含量与黄体酮对应峰面积变化相关性为0.96,雌酮激素含量与雌酮对应峰面积变化相关性为0.98;
所述步骤(2)中,黄体酮与胎盘素对应吸收峰频率为13.52THz和13.96THz;
雌酮与胎盘素对应吸收峰频率为7.45THz和10.83THz。
2.根据权利要求1所述的检测胎盘素里黄体酮和雌酮两种激素的方法,其特征在于,所述步骤(1)中,傅里叶红外光谱检测过程中,使用光源为高压弧汞灯的远红外照射,背景和扫描样品次数均为64次,分辨率为4cm-1,样品扫描波数范围从30cm-1到680cm-1;
液体池取50um厚度,液体池窗使用聚乙烯材料。
3.根据权利要求1所述的检测胎盘素里黄体酮和雌酮两种激素的方法,其特征在于,所述步骤(2)中,在对黄体酮和雌酮标准品检测时,取黄体酮50mg,雌酮60mg,压片采用4.5T进行2分钟压片。
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