[发明专利]检测胎盘素里黄体酮和雌酮两种激素的方法

说明书

本发明提出了检测胎盘素里黄体酮和雌酮两种激素的方法，该方法使用傅里叶红外光谱仪对雌酮，黄体酮和胎盘素进行光谱采集，得到两种标准品与胎盘素对应的吸收峰频率；设置胎盘素不同浓度，采集不同浓度胎盘素远红外及太赫兹波段光谱，并用高效液相色谱法检测出不同浓度胎盘素对应雌酮和黄体酮激素的含量；将不同浓度胎盘素对应两种激素吸收频率的吸收峰面积与不同浓度胎盘素对应两种激素在溶液中含量通过偏最小二乘法建立预测模型，使得只要检测胎盘素在远红外及太赫兹频率段的吸收光谱，并计算出吸收峰面积，就能得到待测胎盘素溶液中黄体酮和雌酮激素的含量。这种方法相较于传统检测手段大大降低了检测繁琐程度，节约了时间，并且成本很低。

技术领域

本发明涉及太赫兹波段的远红外光谱技术领域，尤其涉及检测胎盘素里黄体酮和雌酮两种激素的方法。

背景技术

胎盘素是一种提取胎盘中营养物质成分得到的一类具有生物活性成分的针剂，其所含有的主要成份包括蛋白质、核酸、激素、磷脂类、多糖体、氨基酸、矿物质、维生素类等。由于胎盘素中所含的生物活性物质对体内细胞的活性起到了很好的活化作用，所以近年来越来越受到生物医学界的关注。

黄体酮是卵巢分泌的具有生物活性的主要孕激素。黄体酮可以保护女性的子宫内膜，在女性怀孕期间，孕酮激素可以给胎儿的早期生长及发育提供支持和保障，而且能够对子宫起到一定的镇定作用。雌酮为人体和动物体内天然的雌激素,能够维持雌性个体的第二生理特征及正常的内分泌系统,经常被添加到化妆品中,可以防止皮肤老化增加皮肤弹性。黄体酮和雌酮都是属于胎盘素中的活性物质，因此提供一个有效快速的激素检测方法对胎盘素中激素检测是很有意义的。

远红外光有较强的渗透力和辐射力，具有显著的温控效应和共振效应，它易被物体吸收并转化为物体的内能。远红外光被人体吸收后，可使体内水分子产生共振，使水分子活化，增强其分子间的结合力，从而活化蛋白质等生物大分子，使生物体细胞处于最高振动能级。

太赫兹波是对一个特定波段的电磁福射的统称，其频率范围在0.1-10Hz，太赫兹波具有瞬时性、相干性、低能型、透视性以及水吸收特性。通常生物分子内化学键的振动吸收频率主要在红外波段，但对于分子间的弱相互作用，如氨键、分子的旋转和晶体的声子振动等则对应于太赫兹波段，使得太赫兹技术可用于研究生物分子的结构、构型等问题。

发明内容

本发明的目的在于提供一种检测胎盘素里黄体酮和雌酮两种激素的方法，其解决了目前检测胎盘素中黄体酮和雌酮激素时使用高效液相色谱法的繁琐、耗时、高成本的问题。

为实现上述目的，本发明所采用的技术方案为：一种检测胎盘素里黄体酮和雌酮两种激素的方法，该方法包括：

(1)利用傅里叶红外光谱仪获得胎盘素针剂样本溶液的远红外及太赫兹波段光谱；

(2)利用傅里叶红外光谱仪获得黄体酮、雌酮标准品的光谱，并对比步骤(1)获取的胎盘素光谱，找到两种标准品与胎盘素对应的吸收峰频率；

(3)将胎盘素针剂溶液稀释至浓度为100％，90％，80％，70％，60％，50％，40％，30％，20％九个浓度共计九个样本，每个样本准备两份；

(4)将其中一组样品利用傅里叶红外光谱仪来检测不同浓度胎盘素溶液的光谱图；

(5)将另一组样品利用高效液相色谱法检测不同浓度胎盘素溶液中黄体酮激素和雌酮激素的含量；

(6)将不同浓度胎盘素溶液光谱图对应两种激素的吸收峰面积的数据与对应两种激素的含量真实值进行偏最小二乘法(PLS)模型的建立，得到基于谱峰峰面积的激素含量预测模型。

所述步骤(1)中，傅里叶红外光谱检测过程中，使用光源为高压弧汞灯的远红外照射，背景和扫描样品次数均为64次，分辨率为4cm^-1，样品扫描波数范围从30cm^-1到680cm^-1；