[发明专利]一种嘌呤核苷磷酸化酶突变体、基因及应用

权利要求书

1.一种嘌呤核苷磷酸化酶突变体，其特征在于，由大肠杆菌的嘌呤核苷磷酸化酶第167位甲硫氨酸突变成精氨酸、第168位苯丙氨酸突变成丙氨酸所得；氨基酸序列如SEQ IDNo.4所示。

2.编码如权利要求1所述嘌呤核苷磷酸化酶突变体的基因。

3.如权利要求2所述的基因，其特征在于，核苷酸序列如SEQ ID No.3所示。

4.一种包含如权利要求2或3所述基因的重组表达载体。

5.如权利要求4所述的重组表达载体，其特征在于，由所述基因插入到PET-28a(+)质粒所得。

6.一种包含如权利要求5所述重组表达载体的基因工程菌。

7.如权利要求6所述的基因工程菌，其特征在于，宿主细胞为大肠杆菌BL21。

8.如权利要求1所述嘌呤核苷磷酸化酶突变体在制备2’-氟-2’-脱氧腺苷中的应用。

9.一种制备2’-氟-2’-脱氧腺苷的方法，其特征在于，在反应体系中加入2’-氟-2’-脱氧尿苷、腺嘌呤、胸腺嘧啶磷酸化酶和如权利要求1所述嘌呤核苷磷酸化酶突变体，

先由胸腺嘧啶磷酸化酶催化2’-氟-2’-脱氧尿苷上的尿苷被磷酸根取代得到2’-氟-2’-脱氧核糖-1’-磷酸，再由嘌呤核苷磷酸化酶突变体催化将2’-氟-2’-脱氧核糖-1’-磷酸的磷酸根替换为腺嘌呤得到2’-氟-2’-脱氧腺苷。