[发明专利]一种超高效液相色谱-串联质谱法测定茶叶中16种真菌毒素的方法

权利要求书

1.一种超高效液相色谱-串联质谱法测定茶叶中16种真菌毒素的方法，其特征在于，包括制备供试样品和高效液相色谱-串联质谱法测定；

其中，制备供试样品所用提取液为水按体积比3:1~1:3与体积比为1:5~1:10的甲酸/乙腈，后加入QuEChERS提取盐包；

制备供试样品提取液采用dSPE净化管和Oasis PRIME HLB小柱进行净化；

高效液相色谱-串联质谱法中色谱条件中流动项A为5 ~10mmol·L^-1乙酸铵水溶液+体积比0.1%~1%甲酸水溶液；流动相B：乙腈；质谱条件中，质谱分析的离子源除玉米赤霉烯酮及内标是电喷雾负离子源ESI^-，其余毒素均为电喷雾正离子源ESI⁺，检测方式：多反应离子监测MRM模式，毛细管电压：1.5 kV；锥孔气流：氮气，流速50 L·h^-1；离子源温度：120 ℃；脱溶剂气溶剂气温度：500 ℃，流量为1000 L/hr；碰撞气：高纯氩气；

所检测的16种真菌毒素为：黄曲霉毒素B₁、黄曲霉毒素B₂、黄曲霉毒素G₁、黄曲霉毒素G₂、玉米赤霉烯酮、桔青毒素、脱氧雪腐镰刀菌烯醇、镰刀菌烯酮、雪腐镰刀菌烯醇、赭曲霉毒素、T-2毒素、HT-2毒素、杂色曲霉毒素、伏马毒素B₁、伏马毒素B₂、伏马毒素B₃。

2.根据权利要求1所述的一种超高效液相色谱-串联质谱法测定茶叶中16种真菌毒素的方法，其特征在于：制备供试样品包括如下步骤：

样品处理：取粉碎的待测茶叶0.5g，茶叶样品加入10ml水和10ml体积比1:5~1:10的甲酸/乙腈溶液按混合后，置于自动振荡器中振摇10 min；加入QuEChERS 提取盐包，振摇1min，4000r/min离心5 min，后取出上清液进行净化；

净化：安装HLB小柱，不执行小柱活化步骤，取约0.4 mL上清液通过HLB小柱，弃去滤液，然后再取1 mL上清液，再次通过小柱并收集滤液，将滤液移到含有混合吸附剂的dSPE净化管中，在10000 r/min\下离心10 min，上清液过0.22 μm滤膜；吸取190 μL于300 μL内插管中，加入10 μL稳定同位素混合溶液，涡旋混匀，待进样。