[发明专利]一种单个外泌体的分离方法和核酸测序方法

权利要求书

1.一种单个外泌体的分离方法，包括以下步骤：

1)从体液中分离获得批量外泌体；

2)将所述批量外泌体与油质液滴溶液混合获得混悬液；

3)将所述混悬液用微流控通道进行分离获得单个液滴包裹的单个外泌体；

所述油质液滴溶液中单个油质液滴的粒径为150～250nm。

2.根据权利要求1所述的分离方法，其特征在于，步骤2)中所述的批量外泌体与油质液滴溶液的体积比为1:(8～12)。

3.根据权利要求2所述的分离方法，其特征在于，步骤2)中所述的批量外泌体与油质液滴溶液的体积比为1:10。

4.根据权利要求1或2所述的分离方法，其特征在于，步骤2)中所述混合的温度为20～25℃。

5.根据权利要求3所述的分离方法，其特征在于，步骤2)中所述混合的时间为4～8min。

6.根据权利要求1所述的分离方法，其特征在于，步骤3)中所述的微流控通道为300nm级通道。

7.根据权利要求1所述的分离方法，其特征在于，所述体液包血液、眼泪、尿液、唾液、乳汁、腹水、脑脊液、鼻腔分泌物和阴道分泌物中的一种。

8.根据权利要求1所述的分离方法，其特征在于，步骤1)中所述分离获得批量外泌体的方法包括超速离心法、超滤法、体积排阻色谱、微流控、亲和法和基于聚合物的共沉淀法中的一种。

9.一种单个外泌体的核酸测序方法，包括以下步骤：对权利要求1～8任意一项所述的分离方法分离获得的单个外泌体进行建库测序或纳米孔测序。