[发明专利]一种检测新型冠状病毒的引物、探针及试剂盒

权利要求书

1.一种检测新型冠状病毒的RT-PCR试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包含ORF1ab基因、N基因、E基因、S基因和M基因的特异性引物；

所述ORF1ab基因的特异性引物序列如SEQ ID NO:1~2所示，所述N基因的特异性引物序列如SEQ ID NO:4~5所示，所述E基因的特异性引物序列如SEQ ID NO:7~8所示，所述S基因的特异性引物序列如SEQ ID NO:10~11所示，所述M基因的特异性引物序列如SEQ ID NO:13~14所示。

2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包含ORF1ab基因、N基因、E基因、S基因和M基因的探针；所述ORF1ab基因的探针序列如SEQ ID NO: 3所示，所述N基因的探针序列如SEQ ID NO: 6所示，所述E基因的探针序列如SEQ ID NO: 9所示，所述S基因的探针序列如SEQ ID NO: 12所示，所述M基因的探针序列如SEQ ID NO: 15所示。

3.根据权利要求2所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包含反应液A、反应液B、

反应液C和阴性质控品、2019-nCoV阳性质控品，所述反应液A含有SEQ ID NO:1~3所示的ORF1ab基因的特异引物和探针、SEQ ID NO:4~6所示的N基因的特异引物和探针、SEQ IDNO:7~9所示的E基因的特异引物和探针，所述反应液B含有SEQ ID NO:10~12所示的S基因特异引物和探针、SEQ ID NO:13~15所示的M基因特异引物和探针，反应液C为酶溶液。

4.根据权利要求3所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒的反应体系为：

2×一步法逆转录-聚合酶链式反应缓冲液 III 10ul，

5U/ul Takara Ex 热启动Taq 酶 0.4ul，

PrimeScript逆转录酶混合物 0.4ul，

10uM 上游引物 0.4ul，

10uM 下游引物 0.4ul，

10uM探针 0.8ul，

总 RNA 2ul，

无核糖核酸酶灭菌纯化水 5.6ul。

5.根据权利要求1-4任一项所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒的反应条件为：55℃

15min，1个循环；95℃ 30s，1个循环；95℃ 10s；55℃ 30s，10个循环；95℃ 10s；55℃30s，35个循环。