[发明专利]一种将重组蛋白定位到细胞表面的简便纯化蛋白方法有效
申请号: | 202010253491.6 | 申请日: | 2020-04-01 |
公开(公告)号: | CN111440243B | 公开(公告)日: | 2021-02-23 |
发明(设计)人: | 黄善青;沙万星;刘天意;魏天彪 | 申请(专利权)人: | 黄善青 |
主分类号: | C07K19/00 | 分类号: | C07K19/00;C12N15/70;C12P21/00;C07K1/14 |
代理公司: | 南京申云知识产权代理事务所(普通合伙) 32274 | 代理人: | 邱兴天 |
地址: | 210046 江苏*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 重组 蛋白 定位 细胞 表面 简便 纯化 方法 | ||
1.一种将重组蛋白定位到细胞表面的简便纯化蛋白方法,其特征在于,通过将编码信号肽、化学法切割位点和目的蛋白的基因构建到表达载体中,使得目的蛋白表达后定位到细胞的表面;在收集的细胞中加入含有切割试剂的缓冲液重悬,离心后的上清即为目的蛋白溶液;
其中,信号肽为使用N端1-9位氨基酸MKATKLVLG的lpp与SEQ ID NO.5所示的OmpA融合而成的lpp-ompA;
目的蛋白为以-GSHHW-为Ni2+切割位点的SFGFP和GBI两种融合蛋白,序列如SEQ IDNO.1和2所示;
所述细胞为大肠杆菌。
2.根据权利要求1所述的将重组蛋白定位到细胞表面的简便纯化蛋白方法,其特征在于,使用切割试剂对表达重组蛋白的细胞切割后,只需一步离心就可以获取目的蛋白。
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