[发明专利]一种新型冠状病毒检测试剂盒

说明书

本发明公开了一种新型冠状病毒检测试剂盒，包括底板和固定在底板上的样品垫、胶体金垫、NC膜和吸水垫，在NC膜上设置检测线和质控线，胶体金垫上包被的抗原是由胶体金标记的N蛋白和胶体金标记的S‑RBD蛋白组成的混合抗原蛋白，检测线为小鼠抗人IgM抗体和小鼠抗人IgG抗体检测线。本发明检测试剂盒以N蛋白和S‑RBD蛋白作为抗原，可以提高COVID‑19初步检测的灵敏度，适用于大规模人群的快速筛查。

技术领域

本发明涉及一种胶体金检测试剂盒，特别是涉及一种针对新型冠状病毒的胶体金试剂盒及其制备方法。

背景技术

2019新型冠状病毒（2019-nCoV）是目前已知继SARS、MERS之后第7种可以感染人的冠状病毒。2019-nCoV主要通过呼吸道飞沫传播和接触传播，具有潜伏期长、传染力强、无症状感染等特点。因此，开发有效的诊断试剂盒是有效防控新冠肺炎疫情的关键技术支撑。

目前2019-nCoV感染的实验室检测方法主要为病毒核酸检测，这是临床诊断疑似病例的金标准。然而，该检测方法繁琐、成本高、检测周期较长，而且需要在经过认证的实验室进行，并由专业技术人员操作和判断检测结果，不仅对场地和操作人员有特殊要求，而且检测结果很容易受到样品质量的影响。

2019-nCoV的快速筛查对临床早发现、早诊断、早隔离、早治疗至关重要，开发一种简便、快速、准确的2019-nCoV筛查方法十分必要。

血清特异性抗体是快速、高灵敏诊断病毒感染的指标。与SARS和MERS类似，新型冠状病毒也属于β-冠状病毒，这表明其在宿主体内可能具有相似的免疫反应过程。

当机体感染病毒后，IgM是初次体液免疫应答最早出现的抗体，血清中IgM升高，提示新近发生感染，可用于病毒感染的早期诊断。但IgM的浓度和亲和力较低，持续时间较短，无法判断病毒感染中晚期，特别是对无症状感染者容易漏检。IgG抗体的产生时间晚于IgM，但其浓度和亲和力较高，维持时间较长。特异性IgG抗体具有长期免疫记忆，是判断病毒感染中晚期或既往感染的重要指标。

新型冠状病毒是一种带有囊膜的正链RNA病毒，膜表面编码有刺突蛋白S、膜蛋白M、小包膜蛋白E三种结构蛋白。此外，在病毒核衣壳内还编码有一种重要的结构蛋白，即核衣壳蛋白N（N蛋白）。

目前针对新型冠状病毒的检测试剂盒也大都是选取2019-nCoV的N蛋白作为抗原，且2019-nCoV的N蛋白序列已被公开。在现有胶体金试剂盒技术的基础上，已有公司和研究机构开发并成功制作出N蛋白作为抗原的胶体金示踪试剂盒。

然而，在2019-nCoV病毒感染的初期，由于机体内产生的抗体量极少，N蛋白可能无法准确标记出机体内的抗体，可能会导致漏检。

同时，试剂盒的检测灵敏度通常也低于核酸检测，同样会造成检测结果出现漏检的现象。因此，基于胶体金示踪法的高灵敏度试剂盒还有待进一步开发。

发明内容

本发明的目的是提供一种以N蛋白和S-RBD蛋白作为金标抗原，针对IgG和IgM抗体进行联合检测的新型冠状病毒检测试剂盒，以快速筛查大规模人群，提高新型冠状病毒初步检测的准确度。

本发明所述的新型冠状病毒检测试剂盒包括底板，以及固定在所述底板上的包被有抗原的胶体金垫、设置有质控线和检测线的NC膜、吸水垫和样品垫，其中，在所述NC膜的检测线端依次固定胶体金垫和样品垫，质控线端固定吸水垫。

具体地，本发明所述胶体金垫上包被的抗原是由胶体金标记的N蛋白和胶体金标记的S-RBD蛋白混合组成的混合抗原蛋白。

进而，本发明所述NC膜上设置的检测线为小鼠抗人IgM抗体和小鼠抗人IgG抗体检测线。

为了保证抗原抗体反应的特异性和检出的准确性，本发明选择的小鼠抗人IgG抗体和小鼠抗人IgM抗体均为单克隆抗体。