[发明专利]多基因敲除突变体在旱稻育种中的应用有效
| 申请号： | 202010256963.3 | 申请日： | 2020-04-03 |
| 公开（公告）号： | CN111440819B | 公开（公告）日： | 2023-06-13 |
| 发明（设计）人： | 张业胜;李艳霞;黄立钰;王文;胡凤益 | 申请（专利权）人： | 保山华大智慧农业科技股份有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/82 | 分类号： | C12N15/82;A01H5/00;A01H6/46 |
| 代理公司： | 昆明普发诺拉知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 53209 | 代理人： | 蒋晗 |
| 地址： | 678000 云*** | 国省代码： | 云南;53 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 多基因 突变体 旱稻 育种 中的 应用 | ||
【权利要求书】：
1.一种多基因敲除突变体在旱稻育种中的应用，其特征在于，所述多基因敲除突变体的基因GW2第4外显子位于基因组第2087位碱基A缺失，碱基序列如SEQ ID NO.1；同时多基因敲除突变体的基因SD1第1外显子位于基因组第359-360位间插入碱基A，第377-760位384bp替换为A，碱基序列如SEQ ID NO.2；所述旱稻为旱稻陆引46。
2.根据权利要求1所述的多基因敲除突变体在旱稻育种中的应用，其特征在于，用于检测多基因敲除突变体的引物如下：
GW2-F：AAAAGGGATATGCACCG；
GW2-R：CCAGGCTACAATGACACC；
SD1-F：TCTCATCTCCAATCTCATGGTGGCC；
SD1-R：CAGGTCGGTTTCTTCCCGCTTTC。
3.根据权利要求1所述的多基因敲除突变体在旱稻育种中的应用，其特征在于，多基因敲除突变体通过以下方法获得：利用CRISPR/cas9基因敲除系统构建多靶点表达载体，采用农杆菌介导的方法将多靶点表达载体转化旱稻愈伤组织，对基因GW2和SD1进行定点敲除，获得基因GW2和SD1同时编辑的多基因敲除突变体。
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