[发明专利]一种利用无机杂化纳米花酶快速检测二胺类生物胺的方法

权利要求书

1.一种利用无机杂化纳米花酶快速检测二胺类生物胺的方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：

1)将金属离子加入至二胺氧化酶溶液中，配制无机杂化纳米花酶分散液；

2)将二胺类生物胺溶液与无机杂化纳米花酶分散液混合后，在45-55℃下反应10-30min，得到反应液；

3)将辣根过氧化物酶溶液及TMB显色溶液加入至反应液中，显色后加入稀盐酸终止反应，得到样品；

4)将样品置于分光光度计中检测吸光度值。

2.根据权利要求1所述的一种利用无机杂化纳米花酶快速检测二胺类生物胺的方法，其特征在于，步骤1)中，所述的金属离子包括Co²⁺或Ca²⁺中的一种或两种。

3.根据权利要求1所述的一种利用无机杂化纳米花酶快速检测二胺类生物胺的方法，其特征在于，步骤1)中，所述的二胺氧化酶溶液的制备过程为：将二胺氧化酶加入至浓度为0.05-1mol/L、pH为7-7.5的PBS缓冲液中，配制成浓度为0.1-10mg/mL的溶液。

4.根据权利要求1所述的一种利用无机杂化纳米花酶快速检测二胺类生物胺的方法，其特征在于，步骤1)中，所述的无机杂化纳米花酶分散液的制备过程具体为：将金属离子加入至二胺氧化酶溶液中，在室温下放置2-4天，之后离心、水洗，得到沉淀物，将沉淀物分散于水中，得到无机杂化纳米花酶分散液。

5.根据权利要求4所述的一种利用无机杂化纳米花酶快速检测二胺类生物胺的方法，其特征在于，所述的金属离子在二胺氧化酶溶液中的浓度为100-140mmol/L；离心过程中，转速为7000-8000r/min；所述的无机杂化纳米花酶分散液的浓度为0.1-10mg/mL。

6.根据权利要求1所述的一种利用无机杂化纳米花酶快速检测二胺类生物胺的方法，其特征在于，所述的二胺类生物胺包括组胺或腐胺中的一种或两种。

7.根据权利要求6所述的一种利用无机杂化纳米花酶快速检测二胺类生物胺的方法，其特征在于，

当二胺类生物胺为组胺时，步骤2)中，所述的二胺类生物胺溶液的浓度为2.5-150mmol/L；

当二胺类生物胺为腐胺时，步骤2)中，所述的二胺类生物胺溶液的浓度为5-200mmol/L。

8.根据权利要求1所述的一种利用无机杂化纳米花酶快速检测二胺类生物胺的方法，其特征在于，步骤2)中，所述的二胺类生物胺溶液与无机杂化纳米花酶分散液的体积比为100:(40-60)。

9.根据权利要求1所述的一种利用无机杂化纳米花酶快速检测二胺类生物胺的方法，其特征在于，步骤3)中，所述的辣根过氧化物酶溶液的浓度为0.1-10mg/mL，所述的TMB显色溶液的浓度为0.4-0.6mg/mL，所述的稀盐酸的浓度为1.8-2.2mol/L；所述的辣根过氧化物酶溶液、TMB显色溶液、稀盐酸与二胺类生物胺溶液的体积比为(45-55):(150-250):(45-55):100。

10.根据权利要求1所述的一种利用无机杂化纳米花酶快速检测二胺类生物胺的方法，其特征在于，步骤4)中，在440-460nm处测定吸光度值，根据测出的吸光度值，在标准曲线上读出二胺类生物胺的浓度，或利用标准曲线拟合方程计算得到二胺类生物胺的浓度。