[发明专利]胃蛋白酶原Ⅰ和胃蛋白酶原Ⅱ联合检测试剂盒及其应用

说明书

本发明公开了胃蛋白酶原Ⅰ和胃蛋白酶原Ⅱ联合检测试剂盒及其应用。本发明首次公开了胃蛋白酶原Ⅰ和Ⅱ联合检测试剂盒包括包被抗体和标记抗体，所述包被抗体为名称为单克隆抗体ⅠA的抗PGⅠ单克隆抗体和名称为单克隆抗体ⅡA的抗PGⅡ单克隆抗体；所述标记抗体为名称为单克隆抗体ⅠB的抗PGⅠ单克隆抗体和名称为单克隆抗体ⅡB的抗PGⅡ单克隆抗体。进一步公开了上述试剂盒的应用。本发明利用胃蛋白酶原Ⅰ和Ⅱ联合检测试剂盒在时间分辨荧光免疫分析基础上结合高灵敏度的电感耦合等离子体质谱检测技术，可在一个循环中同时完成PGⅠ和PGⅡ两项指标的检测，缩短了临床获得PGⅠ值及PGⅠ/PGⅡ比值结果的时间，大大的降低了检测成本。

技术领域

本发明属于体外诊断试剂技术领域，具体涉及胃蛋白酶原Ⅰ和胃蛋白酶原Ⅱ联合检测试剂盒及其应用。

背景技术

胃癌是最常见的恶性肿瘤之一，全世界胃癌死亡率高居常见恶性肿瘤死亡率的第二位。早发现、早诊断、早治疗是降低胃癌病死率的关键措施之一。目前胃癌和其他胃部疾病的诊断仍依靠胃镜和组织病理学来确诊，但胃镜检查有一定痛苦，往往不为患者所接受，容易导致延误诊断和治疗。

近年来，血清胃蛋白酶原Ⅰ(PGⅡ)和胃蛋白酶原Ⅱ(PGⅡ)含量变化及其比值(PGⅠ/PGⅡ)与胃部疾病的关系以及其在胃癌早期诊断中的作用越来越引起人们的关注。胃蛋白酶原(pepsinogen，PG)是胃分泌的一种消化酶前体，是胃液中胃蛋白酶的无活性前体，根据生化性质和免疫原性不同，可分为PGⅠ、PGⅡ两种亚型。PGⅠ和PGⅡ是幽门螺旋杆菌(HP)感染和萎缩性胃炎的良好诊断指标，其含量能反映胃粘膜的分泌功能。PGⅠ主要反应的是胃底和胃体的黏膜状态，胃酸分泌增多、胃炎及消化性溃疡PGⅠ升高，胃酸分泌减少或胃黏膜腺体萎缩PGⅠ降低；当发生萎缩性胃炎时会导致胃黏膜主细胞丢失，胃黏膜分泌能力下降，PGⅠ水平明显下降；PGⅡ与胃底黏膜病变的相关性较大(相对于胃窦粘膜)，其升高与胃底腺管萎缩、肠上皮化生或假幽门腺化生、异型增生有关；而且PGⅡ是幽门螺旋杆菌(HP)感染最敏感的指标，PGⅡ升高幅度较PGⅠ明显，PGⅠ/PGⅡ比值降低；因此，联合测定PGⅠ和PGⅡ比值起到了胃底腺粘膜“血清学活检”的作用，通过其血清测量值的不同，在各胃部疾病均有不同程度的改变，为临床提供可靠的诊断价值。

以抗原-抗体为基础的标记免疫分析是实现PGⅠ和PGⅡ定量检测的最常用方法。目前的免疫分析技术中，无论是最早的放射免疫分析(RIA)还是后来逐渐发展起来的非放射性免疫分析方法，如酶联免疫分析(ELISA)和化学发光免疫分析(CLIA)，每次进行检测时只能得到一种疾病标志物的结果，如果需要检测多种疾病标志物，要将血清样品分别加到多个小孔，进行反应和检测，工作繁琐，费时费力，无法实现多指标的同时检测分析。因此，发展一种高通量、低成本的多指标免疫检测方法显的尤为重要。

发明内容

本发明所要解决的技术问题为如何高效和低成本的完成血清中胃蛋白酶原Ⅰ(PGⅡ)和胃蛋白酶原Ⅱ(PGⅡ)两项指标的检测。

为解决上述技术问题，本发明首先提供了胃蛋白酶原Ⅰ和胃蛋白酶原Ⅱ联合检测试剂盒。

本发明所提供的胃蛋白酶原Ⅰ和胃蛋白酶原Ⅱ联合检测试剂盒，包括包被抗体和标记抗体，所述包被抗体为名称为单克隆抗体ⅠA的抗PGⅠ单克隆抗体和名称为单克隆抗体ⅡA的抗PGⅡ单克隆抗体；

所述标记抗体为名称为单克隆抗体ⅠB的抗PGⅠ单克隆抗体和名称为单克隆抗体ⅡB的抗PGⅡ单克隆抗体；

所述单克隆抗体ⅠA和所述单克隆抗体ⅠB为不同的两种单克隆抗体，所述单克隆抗体ⅡA和所述单克隆抗体ⅡB为不同的两种单克隆抗体。

具体的，所述试剂盒中含有所述单克隆抗体ⅠA包被的磁珠、所述单克隆抗体ⅠB包被的磁珠、被名称为稀土元素C1标记的所述单克隆抗体ⅠB和稀土元素C2标记的所述单克隆抗体ⅡB，所述稀土元素C1和稀土元素C2为不同的两种稀土元素。