[发明专利]一种提高细菌外膜囊泡产量的方法及其应用

权利要求书

1.一种制备细菌外膜囊泡的方法，其特征在于包括培养敲除了yjeE基因的大肠杆菌J5株突变株的步骤；将两端带有yjeE基因上下游同源臂、中间为氯霉素抗性基因cat的同源重组片段，导入大肠杆菌J5株，进行同源重组，将大肠杆菌J5株染色体上yjeE基因置换为氯霉素抗性基因，然后消除氯霉素抗性基因，得到敲除了yjeE基因的革兰氏阴性细菌突变株；利用温度敏感型质粒pCP20的FLP位点专一性重组酶，将大肠杆菌J5株染色体上氯霉素抗性基因cat消除；所述敲除了yjeE基因的细菌突变株在通气状态下培养8-12h，然后收集外膜囊泡。

2.根据权利要求1所述方法，其特征在于所述细菌突变株是通过Red重组技术，缺失染色体yjeE基因的。