[发明专利]一种人胎盘提取物上清液制备方法

权利要求书

1.一种人胎盘提取物上清液制备方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：

步骤1，将足月正常分娩胎盘,剥离出胎盘组织，剪碎后再采用机械匀浆法，制得胎盘组织匀浆；

步骤2，清洗胎盘组织匀浆，并进行深低温反复冻融；

步骤3，将反复冻融后的胎盘组织匀浆进行离心、过滤，提取上清液；

步骤4，将上清液送检，检测生长因子的含量，同时检测细菌、真菌、病毒、支原体、内毒素，得到上清液终产品。

2.如权利要求1所述的人胎盘提取物上清液制备方法，其特征在于，步骤1中，所述胎盘为捐献所得，剥离出的胎盘组织主要为去除胎盘羊膜、绒毛膜、底蜕膜及其附带的血管、筋膜后所得的胎盘组织。

3.如权利要求1所述的人胎盘提取物上清液制备方法，其特征在于，步骤1中，所述机械法具体为采用灭菌处理后的手持匀浆仪搅拌完成，所述手持匀浆仪为1-250ml规格转头。

4.如权利要求1所述的人胎盘提取物上清液制备方法，其特征在于，步骤2中，所述深低温反复冻融具体步骤为：将组织匀浆样本分装入50ml离心管中，封口膜封口后，放入-80℃冰箱冷冻12h以上，取出样本，放入37.5℃水浴锅5min内解冻融化，再次重复此步骤。

5.如权利要求1或4所述的人胎盘提取物上清液制备方法，其特征在于，所述深低温反复冻融的次数为2次。

6.如权利要求1所述的人胎盘提取物上清液制备方法，其特征在于，步骤3中，所述离心具体为：取经过剪碎清洗后的胎盘组织10ml于50ml离心管中，用手持匀浆仪，以12000rpm转速对组织进行匀浆处理。

7.如权利要求1所述的人胎盘提取物上清液制备方法，其特征在于，步骤3中，所述过滤具体为：经100目筛网过滤，再经过0.22um滤器过滤。

8.如权利要求1所述的人胎盘提取物上清液制备方法，其特征在于，步骤3中，所述生长因子为FGF、VEGF、PDGF-AB、IGF-1四种。

9.如权利要求1所述的人胎盘提取物上清液制备方法，其特征在于，步骤3中，所述检测具体步骤：用ELISA生长因子检测试剂盒对因子含量进行检测。