[发明专利]一种ApoA-II、ApoC-II检测混合质控品及其制备方法

说明书

本发明提供一种ApoA‑II、ApoC‑II检测混合质控品，为包括三羟甲基氨基甲烷、聚乙二醇6000、ProClin 950、去激素血清和ApoA‑II、ApoC‑II两种蛋白阳性物质的冻干品。所述的ApoA‑II、ApoC‑II检测混合质控品的制备方法包括如下步骤：(1)制备人ApoA‑II、ApoC‑II基因克隆与表达载体；(2)利用80L发酵罐大规模发酵表达rhApoA‑II、rhApoC‑II；(3)rhApoA‑II、rhApoC‑II的纯化；(4)ApoA‑II、ApoC‑II蛋白质控品的的配制、赋值与分装。本发明使用真核细胞体系制备的ApoA‑II、ApoC‑II检测混合质控品稳定性好、成本低，使用简便、有利于动物实验的使用，不受运输、温度因素影响，检测重复性好，稳定性高，能满足临床对ApoA‑II、ApoC‑II检测的质量控制要求，可以提高临床样本检测结果的准确性。

技术领域

本发明涉及一种检测质控品，具体涉及一种ApoA-II、ApoC-II检测混合质控品及其制备方法。

背景技术

载脂蛋白是血浆脂蛋白中的蛋白质部分，能够结合和运输血脂到机体各组织进行代谢及利用的蛋白质。大量研究发现载脂蛋白基因发生突变，形成不同等位基因型多态性，并进一步形成不同表型的载脂蛋白，可影响血脂代谢和利用，从而影响高脂血症、动脉粥样硬化、心脑血管疾病等的发生和发展。

载脂蛋白主要分A、B、C、D、E五类，基本功能是运载脂类物质及稳定脂蛋白的结构，某些载脂蛋白还有激活脂蛋白代谢酶、识别受体等功能。主要在肝(部分在小肠)合成，按ABC系统命名，各类又可细分几个亚类，以罗马数字表示。

载脂蛋白是构成血浆脂蛋白的重要组分，赋予脂类以可溶的形式，而且在血浆脂蛋白代谢中起重要作用：(1)促进脂类运输；(2)调节酶活性；(3)引导血浆脂蛋白同细胞表面受体结合，是功能上极其活跃的一组血浆蛋白质。

ApoA-II是HDL中第二种含量多的载脂蛋白，在HDL2占载脂蛋白的15％，在HDL3中占载脂蛋白的25％。CM中达总载脂蛋白的7％～10％，VLDL中也少量存在。直到1985年，ApoA-II蛋白质的氨基酸序列、cDNA序列及基因序列均已阐明。ApoA-II是由两条多肽链的77个氨基酸残基组成。ApoA-II在不加还原剂的SDS-PAGE中测出分子量是17000D，在人血浆中以二聚体形式存在。 ApoA-II的单体分子量为8700D。人ApoA-II蛋白C端氨基酸残基为谷氨酸，N 端为吡咯烷酮酸，缺乏组氨酸，精氨酸及色氨酸。ApoA-II有多态性存在，最主要的多态型等电点为4.9，而含量较少的多态型的等电点为5.17、4.68、4.42 和4.20。

载脂蛋白C是极低密度脂蛋白胆固醇的主要载脂蛋白，也存在于高密度脂蛋白-胆固醇和低密度脂蛋白-胆固醇中，有3种不同的载脂蛋白C，即ApoC-I、 ApoC-II、ApoC-III，它是CM、VLDL他和HDL的少量结构蛋白。

目前，ApoA-II、ApoC-II检测混合质控品具有如下缺点：稳定性差、成本高，使用不方便，不利于动物实验的使用，检测重复性差，临床样本检测结果准确性差。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供一种ApoA-II、ApoC-II检测混合质控品及其制备方法，稳定性好、成本低，使用简便、有利于动物实验的使用，不受运输、温度因素影响，检测重复性好，能满足临床对ApoA-II、ApoC-II检测的质量控制要求，可以提高临床样本检测结果的准确性。

为解决上述技术问题，本发明的实施例提供一种ApoA-II、ApoC-II检测混合质控品，为包括去激素血清和ApoA-II、ApoC-II两种蛋白阳性物质的冻干品。

其中，所述的ApoA-II、ApoC-II检测混合质控品还包括三羟甲基氨基甲烷、聚乙二醇6000和ProClin 950。

优选的，所述三羟甲基氨基甲烷的浓度≥99.9％。