[发明专利]海洋水体中生物蝶呤的检测方法

权利要求书

1.一种海洋水体中生物蝶呤的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：

1）前处理：水样采用孔径为0.2~0.3μm的滤膜过滤后弃滤液，取颗粒物并加入细胞裂解液振荡，超声破碎后将产物超声水浴，得到溶出液；调节所述溶出液的pH为6~7，加入氯仿振荡离心，萃取后得到含有生物蝶呤的水相；

其中，所述细胞裂解液的组分为5%甲醇和95%水，使用盐酸调节pH为3~4；

2）用反相高效液相色谱对所述含有生物蝶呤的水相进行检测；

其中，反相高效液相色谱采用等度洗脱，流动相为甲醇和水；基于流动相的总体积，甲醇的体积为5%至15%，水的体积为85%至95%；色谱柱为C18反相键合硅胶柱；色谱柱的柱温为25℃至30℃，所述流动相的流速为0.6 mL/min至0.8 mL/min；反相高效液相色谱检测时，激发波长为275 nm至285 nm，发射波长为442 nm至446 nm；

3）液相色谱-质谱联用：液质联用获得生物蝶呤的质谱信息，离子源为电喷雾离子源，扫描模式为负离子模式，毛细管电压为3 KV至5 KV，雾化气压力40 psi至50 psi，干燥气温度为300 ℃至400 ℃，干燥气流速为10 L/min至12 L/min，扫描范围为50 m/z至300 m/z，选择192和147作为生物蝶呤的定量子离子进行分析。