[发明专利]一种用于时间分辨荧光免疫层析抗体标记试剂及其制备方法

说明书

本发明公开了一种用于时间分辨荧光免疫层析抗体标记试剂，由磷酸三钠，三聚磷酸钠，2‑(N‑吗啡啉)乙烷磺酸钠(MES)，1‑(3‑二甲氨基丙基)‑3‑乙基碳二亚胺(EDC)，N‑羟基琥珀酰亚胺(NHS)组成；本发明还公开了一种用于时间分辨荧光免疫层析抗体标记试剂制备方法，包括如下步骤：原料准备；将2‑(N‑吗啡啉)乙烷磺酸钠(MES)置于容器中，并向容器中加水进行溶解；用氢氧化钠调节PH值；将1‑(3‑二甲氨基丙基)‑3‑乙基碳二亚胺(EDC)，N‑羟基琥珀酰亚胺(NHS)加入调节PH值后的溶液中，并搅拌均匀；将磷酸三钠，三聚磷酸钠加入上述搅拌均匀的混合溶液中，并调节PH值；本发明，通过化学偶联的方式结合蛋白物质，提高了标记物的稳定性和检测灵敏性，提高了检测效率。

技术领域

本发明属于标记试剂技术领域，具体涉及一种用于时间分辨荧光免疫层析抗体标记试剂还涉及一种该试剂的制备方法。

背景技术

以荧光物质标记抗体而进行抗原定位的技术称为荧光抗体技术。用荧光抗体示踪或检查相应抗原的方法称荧光抗体法；用已知的荧光抗原标记物示踪或检查相应抗体的方法称荧光抗原法。这两种方法总称免疫荧光技术，因为荧光色素不但能与抗体球蛋白结合，用于检测或定位各种抗原，也可以与其他蛋白质结合，用于检测或定位抗体，但是在实际工作中荧光抗原技术很少应用，所以人们习惯称为荧光抗体技术，或称为免疫荧光技术。

时间分辨荧光免疫检测技术是上世纪80年代提出的一种较为新型的检测手段；用镧系元素及其荧光配合物作为标记物，与化学发光、电化学发光免疫检测技术并称为三大超灵敏检测技术，在医学临床检测、生物学科研检测方面有较广泛的应用。

申请号为CN201811059144.9的时间分辨荧光免疫层析抗体标记试剂的配方及其制备方法，抗体标记试剂配方为磷酸氢二钠3-6％，磷酸二氢钠2-5％，2-吗啉乙磺酸(MES)8-15％，1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺(EDC)40-60％，N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)15-20％，总质量组成为100％。

为了提高标记物的稳定性和检测灵敏性，为此我们提出一种用于时间分辨荧光免疫层析抗体标记试剂及其制备方法。

发明内容

本发明的目的在于提供一种用于时间分辨荧光免疫层析抗体标记试剂及其制备方法，提高标记物的稳定性和检测灵敏性。

为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：一种用于时间分辨荧光免疫层析抗体标记试剂，由磷酸三钠，三聚磷酸钠，2-(N-吗啡啉)乙烷磺酸钠(MES)，1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺(EDC)，N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)组成，其组分按重量百分比计为：磷酸三钠2-4％，三聚磷酸钠4-8％，2-(N-吗啡啉)乙烷磺酸钠(MES)6-12％，1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺(EDC)40-60％，N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)10-30％。

作为本发明的一种优选的技术方案，由磷酸三钠，三聚磷酸钠，2-(N-吗啡啉)乙烷磺酸钠(MES)，1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺(EDC)，N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)组成，其组分按重量百分比计为：磷酸三钠3％，三聚磷酸钠6％，2-(N-吗啡啉)乙烷磺酸钠(MES)11％，1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺(EDC)60％，N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)20％。

作为本发明的一种优选的技术方案，荧光物质为异硫氰酸荧光素(FITC)、四乙基罗丹明(RB200)、四甲基异硫氰酸罗丹明(TRITC)、藻红蛋白(PE)中的一种。

本发明还公开了一种用于时间分辨荧光免疫层析抗体标记试剂制备方法，所述制备方法如下：