[发明专利]一种改善砷暴露所致糖代谢异常的膳食营养补充剂及其筛选方法

权利要求书

1.一种改善砷暴露所致糖代谢异常的膳食营养补充剂筛选方法，其特征是，包括以下步骤：

第一步、取健康成年小鼠若干只，将雄鼠和雌鼠合笼交配，然后检查雌鼠是否有阴栓；以检查到阴栓的当天为妊娠第0天，将检查到阴栓的雌鼠作为F0代孕鼠；将F0代孕鼠随机平均分为三组，即对照组、阳性组、干预组；

第二步、自妊娠第1天起，对照组、阳性组、干预组的F0代孕鼠分别给予不同的饮水，同时维持正常喂食；其中，对照组孕鼠的饮水为正常饮用水，阳性组孕鼠的饮水为含有预设浓度的砷的水溶液，干预组孕鼠的饮水为既含有相同预设浓度的砷、又含有候选药剂的水溶液；

第三步、在妊娠第N天时，在各组孕鼠中剔除明确未怀孕的雌鼠；N为正整数，且10≤N≤16；之后，在妊娠第18天，检测各组F0代孕鼠的空腹血糖与糖耐量；判断干预组的各项指标是否优于阳性组，若否则淘汰候选药剂，若是则转至第四步；

第四步、当各组孕鼠分娩结束时，各组孕鼠的饮水均采用正常饮用水，同时维持正常喂食；各组孕鼠分娩的小鼠作为F1代子鼠；在各组F1代子鼠的哺乳期结束后，将各组子鼠按雌雄性别分笼，饮水均采用正常饮用水，同时维持正常喂食；在饲养各组F1代子鼠至预设周龄时，检测各组F1代子鼠的空腹血糖与糖耐量；判断干预组的各项指标是否优于阳性组，若否则淘汰候选药剂，若是则转至第五步；

第五步、将各组F1代子鼠的雄鼠和雌鼠分别合笼组内交配，然后检查雌鼠是否有阴栓；以检查到阴栓的当天为妊娠第0天，将检查到阴栓的雌鼠作为F1代孕鼠；各组F1代孕鼠饮水均采用正常饮用水，同时维持正常喂食；在妊娠第M天时在各组孕鼠中剔除明确未怀孕的雌鼠，M为正整数且M＝N；

第六步、在各组F1代孕鼠分娩后，将其分娩的小鼠作为F2代子鼠，同时各组F1代孕鼠的饮水均采用正常饮用水并维持正常喂食；在各组F2代子鼠的哺乳期结束后，将各组子鼠按雌雄性别分笼，饮水均采用正常饮用水，同时维持正常喂食；在饲养各组F2代子鼠至预设周龄时，检测各组F1代子鼠的空腹血糖与糖耐量；判断干预组的各项指标是否优于阳性组，若否则淘汰候选药剂，若是则将候选药剂作为改善砷暴露所致糖代谢异常的膳食营养补充剂；

第三步、第四步、第六步中，检测空腹血糖与糖耐量的具体过程为：在检测前至少12小时，将各组鼠禁食不禁水；检测时，先从各组鼠眼眶取血并测定其葡萄糖浓度，此即空腹血糖，也记作0min血糖，之后以预定浓度的葡萄糖溶液对各组鼠灌胃，并在灌胃后的30min、60min、120min分别从各组鼠眼眶取血并测定其葡萄糖浓度，即得30min血糖、60min血糖、120min血糖；统计计算各组鼠的0min血糖、30min血糖、60min血糖、120min血糖，并绘制葡萄糖耐量曲线，计算糖耐量曲线下面积AUC；

判断干预组的各项指标优于阳性组的判断标准由第一标准和第二标准构成；

所述第一标准为：干预组的0min血糖、120min血糖、糖耐量曲线下面积AUC均小于阳性组的相应指标；

所述第二标准为：与对照组相应指标相比，干预组的0min血糖、120min血糖、糖耐量曲线下面积AUC的统计学差异均小于阳性组相应指标的统计学差异；

满足第一标准和第二标准，则判断干预组的各项指标优于阳性组；

第一步中，在合笼交配时，雄鼠与雌鼠的交配比例至少为2:1；对照组、阳性组、干预组的F0代孕鼠至少为20只；第五步中，对于各组F1代孕鼠，在剔除明确未怀孕的雌鼠后，若各组孕鼠数量小于预定数量，则将各组明确未怀孕的雌鼠与相应各组F1代子鼠的雄鼠重复交配，确保各组孕鼠数量大于或等于预定数量；

第四步、第六步中，所述哺乳期的时间为21天，所述预设周龄为10周龄。

2.根据权利要求1所述的筛选方法，其特征是，第二步中，在各水溶液中，砷的预设浓度为50ppm；第三步、第四步、第六步中，葡萄糖溶液的预定浓度为3mol/L。

3.根据权利要求2所述的筛选方法，其特征是，第一步中，所述健康成年小鼠为健康成年的SPF级C57BL/6J小鼠。