[发明专利]MicroRNA微纳米球的制备方法及其在脊髓损伤修复中的应用在审
申请号: | 202010271865.7 | 申请日: | 2020-04-09 |
公开(公告)号: | CN111437268A | 公开(公告)日: | 2020-07-24 |
发明(设计)人: | 顾晓松;汤欣 | 申请(专利权)人: | 尧舜泽生物医药(南京)有限公司 |
主分类号: | A61K9/52 | 分类号: | A61K9/52;A61K47/34;A61K31/7105;A61P25/28 |
代理公司: | 南京纵横知识产权代理有限公司 32224 | 代理人: | 王玉 |
地址: | 210000 江苏省南京市江*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | microrna 纳米 制备 方法 及其 脊髓 损伤 修复 中的 应用 | ||
1.MicroRNA微纳米球的制备方法,其特征是,包括:
采用复乳法制备聚乳酸-羟基乙酸共聚物微纳米球溶液;
将聚醚酰亚胺水溶液加入到聚乳酸-羟基乙酸共聚物微纳米球溶液充分振荡混匀形成聚醚酰亚胺修饰的聚乳酸-羟基乙酸共聚物微纳米球复合物溶液;
将不同的MicroRNAs负载到微球上,形成MicroRNAs微球复合物。
2.根据权利要求1所述的MicroRNA微纳米球的制备方法,其特征是,所述的聚乳酸-羟基乙酸共聚物微纳米球溶液的具体制备方法为:
将聚乳酸-羟基乙酸共聚物溶于二氯甲烷中得到10%的聚乳酸-羟基乙酸共聚物溶液,同时分别制备7%和1%的聚乙烯醇水溶液;
将10%的聚乳酸-羟基乙酸共聚物溶液和7%聚乙烯醇溶液混合并超声产生乳状液,然后将乳状液加入1%的聚乙烯醇溶液继续超声,并持续搅拌以去除二氯甲烷,最后用双蒸水洗涤,并重悬于双蒸水中保存,得到聚乳酸-羟基乙酸共聚物微纳米球溶液。
3.根据权利要求1所述的MicroRNA微纳米球的制备方法,其特征是,所述的聚醚酰亚胺修饰的聚乳酸-羟基乙酸共聚物微纳米球复合物溶液的具体制备方法为:将聚乳酸-羟基乙酸共聚物微球水溶液与聚醚酰亚胺共溶于ddH2O,得到的溶液加入到聚乳酸-羟基乙酸共聚物微球溶液中,稍加涡旋,制得聚醚酰亚胺修饰的聚乳酸-羟基乙酸共聚物微纳米球复合物溶液。
4.根据权利要求1所述的MicroRNA微纳米球的制备方法,其特征是,所述的MicroRNAs为miR-93、miR-9、miR-132、miR-124、miR-126,其核苷酸序列如SEQ ID NO:1~SEQ ID NO:10所示。
5.根据权利要求1所述的MicroRNA微纳米球的制备方法,其特征是,所述的超声采用超声破碎仪。
6.根据权利要求1所述的MicroRNA微纳米球的制备方法,其特征是,用双蒸水洗涤时,采用离心机在13000rpm条件下离心3分钟。
7.根据权利要求1所述的MicroRNA微纳米球的制备方法,其特征是,所述的聚乳酸-羟基乙酸共聚物微纳米球重悬于双蒸水中于4℃保存。
8.根据权利要求1-7中任意一项所述的方法制备的MicroRNA微纳米球在脊髓损伤修复中的应用。
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