[发明专利]一种胶体金法检测新型冠状病毒IgM的检测卡及其制备方法

权利要求书

1.一种胶体金法检测新型冠状病毒IgM的检测卡，其特征在于：包括样品垫(5)、反应垫(4)和硝酸纤维素膜(2)；在所述硝酸纤维素膜(2)上划有相平行的检测线和质控线，所述检测线上包被有新型冠状病毒重组抗原，所述质控线上包被有新型冠状病毒羊多抗IgG，在所述硝酸纤维素膜(2)上固定反应垫(4)，反应垫(4)上标记有新型冠状病毒鼠抗人IgM抗体，在所述反应垫(4)上固定样品垫(5)。

2.根据权利要求1所述胶体金法检测新型冠状病毒IgM的检测卡，其特征在于：所述检测卡还包括检测卡壳、底板(1)和吸水纸(3)，在所述底板(1)的中部固定硝酸纤维素膜(2)，在所述硝酸纤维素膜(2)的右部固定吸水纸(3)，所述底板(1)、样品垫(5)、反应垫(4)、硝酸纤维素膜(2)和吸水纸(3)组成的试剂条放置在检测卡壳中，样品垫(5)放置在检测卡壳加样孔端。

3.一种权利要求1所述检测线和质控线的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：在硝酸纤维素膜(2)上用浓度为0.5-1.5mg/mL的新型冠状病毒重组抗原点样划线包被得到检测线，在硝酸纤维素膜(2)上用浓度为0.5-1.5mg/mL的新型冠状病毒羊多抗IgG点样划线包被得到质控线；将划有检测线和质控线的硝酸纤维素膜(2)用封闭液在22-38℃下浸泡封闭15-40分钟后风干。

4.根据权利要求3所述检测线和质控线的制备方法，其特征在于：所述检测线和质控线的粗细为0.4-1.2mm，所述检测线或质控线的点样量按4-8mm宽的检测卡上点样0.8-1.6μL。

5.根据权利要求3所述检测线和质控线的制备方法，其特征在于：所述封闭液包括磷酸盐缓冲液、牛血清白蛋白和吐温20，所述磷酸盐缓冲液浓度为9-11mmol/L、pH为7.1-7.4，所述牛血清白蛋白的质量分数为0.9-1.1％，所述吐温20的质量分数为0.09-0.12％。

6.一种权利要求1所述反应垫的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

第一步，配制浓度为0.005-0.015％的氯金酸溶液，将所述氯金酸溶液煮沸后，按每100mL氯金酸溶液中加入0.8-1.2％的柠檬酸三钠溶液2.5-3.5mL，继续煮沸，待冷却至室温后，用90-110mmol/L碳酸钾溶液调pH至8.0-8.4，得到胶体金溶液；

第二步，在100mL胶体金溶液中加入550-650μg新型冠状病毒鼠抗人IgM抗体，搅拌、静置，然后加入浓度为0.8-1.2％牛血清白蛋白搅拌，离心、过滤，所得沉淀为胶体金标记鼠抗人IgM抗体；

第三步，在胶体金标记鼠抗人IgM抗体中加水稀释至0.8-4mg/mL，稀释后按35-45μL/cm²均匀喷涂于玻璃纤维素膜上，冷冻真空干燥后得到反应垫。

7.根据权利要求6所述反应垫的制备方法，其特征在于：第一步中，所述继续煮沸时间为80-120秒。

8.根据权利要求6所述反应垫的制备方法，其特征在于：第二步中，所述离心转速为11000-13000rpm。

9.根据权利要求6所述反应垫的制备方法，其特征在于：第二步中，所述静置为在3-5℃条件下静置。

10.根据权利要求6所述反应垫的制备方法，其特征在于：第三步中，所述冷冻真空干燥在温度为-22～-18℃、真空度为190-210Pa下进行。