[发明专利]一种结核病候选疫苗融合蛋白有效
申请号: | 202010277818.3 | 申请日: | 2020-04-10 |
公开(公告)号: | CN111518180B | 公开(公告)日: | 2023-01-03 |
发明(设计)人: | 赵容川;鲍朗 | 申请(专利权)人: | 四川大学 |
主分类号: | C07K14/35 | 分类号: | C07K14/35;C12N15/70;A61K39/04;A61P31/06 |
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地址: | 610065 四川*** | 国省代码: | 四川;51 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 结核病 候选 疫苗 融合 蛋白 | ||
1.一种重组蛋白Dodecin-ESAT6,其特征在于,Dodecin-ESAT6由结核分枝杆菌Rv1498a-Rv3875嵌合基因编码。
2.如权利要求1所述的重组蛋白Dodecin-ESAT6,其特征在于,由结核分枝杆菌抗原ESAT6和结核分枝杆菌多聚体蛋白Dodecin组成的融合蛋白。
3.如权利要求1所述的重组蛋白Dodecin-ESAT6的制备方法,其特征在于,该方法需具备以下几个步骤:
(1)结核分枝杆菌Rv3875、Rv1498a基因的扩增;
(2)使用重叠延伸法对Rv1498a-Rv3875嵌合基因的扩增;
(3)将Rv1498a-Rv3875嵌合基因插入至大肠杆菌质粒pet28a中,构建rpET28aRv1498a-Rv3875重组质粒;
(4)将(3)中的重组质粒热激转化入大肠杆菌BL21(DE3);
(5)用卡那霉素进行筛选;
(6)用菌落PCR筛选阳性克隆及测序鉴定;
(7)IPTG诱导后收集细菌蛋白,Western-blot鉴定Dodecin-ESAT6重组蛋白。
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