[发明专利]高效液相色谱检测维生素B1的EP杂质及降解杂质的方法

说明书

本发明公开了高效液相色谱检测维生素B1的EP杂质的方法，其特征在于，选用Merck Lichrospher 100 RP18色谱柱，以庚烷磺酸钠溶液和甲醇为流动相，流动相的流速设置为0.9ml/min～1.1ml/min，采用梯度洗脱，所述庚烷磺酸钠溶液浓度为18mmol/L～22mmol/L，其PH值为2.6～3.0。本发明的有益效果是，利用方便快捷的高效液相色谱法，对维生素B1的EP杂质进行检测，重复性、准确度均十分良好，有利于药品的质量控制；采用碱性溶液进行降解，降解效果佳。

技术领域

本发明涉及药物分析技术领域，特别是高效液相色谱检测维生素B1的EP杂质及降解杂质的方法。

背景技术

维生素B1，化学名为氯化3-[(4-氨基-2-甲基-5-嘧啶基)-甲基]-5-2-羟乙基)-4-甲基噻唑鎓盐酸盐，其化学结构如下：

维生素B1又称硫胺素，是最早被人们提纯的水溶性维生素，具有维持正常糖代谢及神经传导的功能，用于治疗脚气和中枢神经及胃肠病、心脏活动失调等疾病。

维生素B1已被中国药典、欧洲药典、日本药典收录，除欧洲药典提供的有关物质检测方法对单个已知杂质(杂质A、杂质B、杂质C)进行分离并单独控制外，其他各国药典均未对单个杂质进行分离并控制；其中，欧洲药典对物质检测方法为，采用色谱柱规格为：MerckLichrospher 100RP18，250×4mm，5μm，其中流动相A为3.764g/L己烷磺酸钠溶液(用磷酸调节pH值至3.1)，流动相B为甲醇，其检测波长为248nm，流速为1.0ml/min，柱温为45℃，进样量为25μl，其梯度洗脱程序见附图1；系统适用性溶液配制：分别取维生素B1及欧洲药典杂质A、杂质B、杂质C、杂质D、杂质E、杂质F、杂质G、杂质H对照品适量，加5％乙酸溶液溶解并稀释制成每1ml中约含HCC3.5mg，各有关物质均约20μg的溶液，作为系统适用性溶液；按照上述检测条件，量取系统适用性溶液25μl，注入液相色谱仪，记录色谱图(见附图2)，结果表明，杂质B与杂质D重合，维生素B1主峰及各杂质均拖尾严重，主峰拖尾因子为5.6，杂质最大拖尾因子为2.3。

因此欧洲药典有关物质方法控制的杂质A、杂质B、杂质C实际上也并不是维生素B1的降解杂质，不便于人们进行适用，为了保证维生素B1生产及存储过程中的质量，需寻找一种可对其降解杂质进行控制的方法，便于我们使用的需要。

发明内容

本发明的目的是为了解决目前市场上并没有对维生素B1的杂质进行准确且有效分离的问题，因此我们设计了一种高效检测维生素B1的EP杂质及降解杂质的方法，具体为高效液相色谱检测维生素B1的EP杂质及降解杂质的方法。

实现上述目的本发明的技术方案为，高效液相色谱检测维生素B1的EP杂质的方法，选用Merck Lichrospher 100RP18色谱柱，以庚烷磺酸钠溶液和甲醇为流动相，流动相的流速设置为0.9ml/min～

1.1ml/min，采用梯度洗脱，所述庚烷磺酸钠溶液浓度为18mmol/L～22mmol/L，其PH值为2.6～3.0；其中，流动相的流速优选为1.0mL/min，所述庚烷磺酸钠溶液浓度优选20mmol/L，PH值优选为2.8。

对方案的进一步补充，所述庚烷磺酸钠溶液中含有0.5％三乙胺。

对方案的进一步补充，所述Merck Lichrospher 100RP18色谱柱选用：内径为4mm，长度为250mm，填料粒径为5μm的Merck Lichrospher 100 RP18色谱柱。

对方案的进一步补充，其进样量为25μL，柱温为38℃～42℃。

对方案的进一步补充，选用紫外检测器，其检测波长为246nm～250nm。

对方案的进一步补充，供试品溶液维生素B1的浓度为1.5mg/mL。