[发明专利]血小板抗原基因分型的质谱检测方法及试剂盒在审
申请号: | 202010278593.3 | 申请日: | 2020-04-10 |
公开(公告)号: | CN111455027A | 公开(公告)日: | 2020-07-28 |
发明(设计)人: | 梁文飙;朱毅;吕红;刘成成;周小玉;张若洋;周春;王静;项汉城;汤丁洁;孙少岩;詹彤;濮星;胡健;唐宁;朱爱宁;洪轲;石宇鹏 | 申请(专利权)人: | 江苏省血液中心 |
主分类号: | C12Q1/6837 | 分类号: | C12Q1/6837;C12Q1/6888 |
代理公司: | 南京知识律师事务所 32207 | 代理人: | 高玲玲 |
地址: | 210037 江*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 血小板 抗原 基因 检测 方法 试剂盒 | ||
1.一种血小板抗原基因分型的质谱检测方法,其特征在于包括以下步骤:
(1)准备待测DNA;
(2)提供所有靶点SNP的扩增引物,使用多重PCR技术扩增含有目的SNP的DNA序列;
(3)对步骤(2)获得的扩增引物用碱性磷酸酶进行纯化处理,除去未结合的dNTPs;
(4)提供每个靶点SNP延伸引物,将混合好的延伸引物加入步骤(3)纯化后的产物中,以ddNTP为底物,进行单碱基延伸,每个SNP的等位基因延伸产物仅为末端一个碱基的差异;
(5)纯化步骤(4)获得的单碱基延伸的产物,并将产物转移到SpectroCHIP芯片上,进行质谱检测,确定其基因型。
2.根据权利要求1所述的血小板抗原基因分型的质谱检测方法,其特征在于:所述扩增引物包括正向引物和反向引物,正向引物、反向引物和延伸引物的序列如下表所示:
WELL | 检测的基因 | 反向引物 | 正向引物 | 延伸引物 |
W1 | HPA-16w | SEQ ID No:1 | SEQ ID No:2 | SEQ ID No:61 |
W1 | HPA-27bw | SEQ ID No:3 | SEQ ID No:4 | SEQ ID No:62 |
W1 | HPA-1 | SEQ ID No:5 | SEQ ID No:6 | SEQ ID No:63 |
W1 | HPA-17w | SEQ ID No:7 | SEQ ID No:8 | SEQ ID No:64 |
W1 | HPA-7w | SEQ ID No:9 | SEQ ID No:10 | SEQ ID No:65 |
W1 | HPA-8w | SEQ ID No:11 | SEQ ID No:12 | SEQ ID No:66 |
W1 | HPA-14w | SEQ ID No:13 | SEQ ID No:14 | SEQ ID No:67 |
W1 | HPA-24bw | SEQ ID No:15 | SEQ ID No:16 | SEQ ID No:68 |
W1 | HPA-26bw | SEQ ID No:17 | SEQ ID No:18 | SEQ ID No:69 |
W1 | HPA-15 | SEQ ID No:19 | SEQ ID No:20 | SEQ ID No:70 |
W1 | HPA-21w | SEQ ID No:21 | SEQ ID No:22 | SEQ ID No:71 |
W1 | HPA-22bw | SEQ ID No:23 | SEQ ID No:24 | SEQ ID No:72 |
W1 | HPA-28bw | SEQ ID No:25 | SEQ ID No:26 | SEQ ID No:73 |
W1 | HPA-6_1 | SEQ ID No:27 | SEQ ID No:28 | SEQ ID No:74 |
W1 | HPA-13w | SEQ ID No:29 | SEQ ID No:30 | SEQ ID No:75 |
W1 | HPA-23bw | SEQ ID No:31 | SEQ ID No:32 | SEQ ID No:76 |
W1 | HPA-18w | SEQ ID No:33 | SEQ ID No:34 | SEQ ID No:77 |
W1 | HPA-10w | SEQ ID No:35 | SEQ ID No:36 | SEQ ID No:78 |
W1 | HPA-2 | SEQ ID No:37 | SEQ ID No:38 | SEQ ID No:79 |
W1 | HPA-5 | SEQ ID No:39 | SEQ ID No:40 | SEQ ID No:80 |
W2 | HPA-19w | SEQ ID No:41 | SEQ ID No:42 | SEQ ID No:81 |
W2 | HPA-3 | SEQ ID No:43 | SEQ ID No:44 | SEQ ID No:82 |
W2 | HPA-20w | SEQ ID No:45 | SEQ ID No:46 | SEQ ID No:83 |
W2 | HPA-9w | SEQ ID No:47 | SEQ ID No:48 | SEQ ID No:84 |
W2 | HPA-11w | SEQ ID No:49 | SEQ ID No:50 | SEQ ID No:85 |
W2 | HPA-4 | SEQ ID No:51 | SEQ ID No:52 | SEQ ID No:86 |
W2 | HPA-6_2 | SEQ ID No:53 | SEQ ID No:54 | SEQ ID No:87 |
W2 | HPA-29bw | SEQ ID No:55 | SEQ ID No:56 | SEQ ID No:88 |
W2 | HPA-25bw | SEQ ID No:57 | SEQ ID No:58 | SEQ ID No:89 |
W2 | HPA-12w | SEQ ID No:59 | SEQ ID No:60 | SEQ ID No:90 |
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