[发明专利]血小板抗原基因分型的质谱检测方法及试剂盒在审

专利信息
申请号: 202010278593.3 申请日: 2020-04-10
公开(公告)号: CN111455027A 公开(公告)日: 2020-07-28
发明(设计)人: 梁文飙;朱毅;吕红;刘成成;周小玉;张若洋;周春;王静;项汉城;汤丁洁;孙少岩;詹彤;濮星;胡健;唐宁;朱爱宁;洪轲;石宇鹏 申请(专利权)人: 江苏省血液中心
主分类号: C12Q1/6837 分类号: C12Q1/6837;C12Q1/6888
代理公司: 南京知识律师事务所 32207 代理人: 高玲玲
地址: 210037 江*** 国省代码: 江苏;32
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摘要:
搜索关键词: 血小板 抗原 基因 检测 方法 试剂盒
【权利要求书】:

1.一种血小板抗原基因分型的质谱检测方法,其特征在于包括以下步骤:

(1)准备待测DNA;

(2)提供所有靶点SNP的扩增引物,使用多重PCR技术扩增含有目的SNP的DNA序列;

(3)对步骤(2)获得的扩增引物用碱性磷酸酶进行纯化处理,除去未结合的dNTPs;

(4)提供每个靶点SNP延伸引物,将混合好的延伸引物加入步骤(3)纯化后的产物中,以ddNTP为底物,进行单碱基延伸,每个SNP的等位基因延伸产物仅为末端一个碱基的差异;

(5)纯化步骤(4)获得的单碱基延伸的产物,并将产物转移到SpectroCHIP芯片上,进行质谱检测,确定其基因型。

2.根据权利要求1所述的血小板抗原基因分型的质谱检测方法,其特征在于:所述扩增引物包括正向引物和反向引物,正向引物、反向引物和延伸引物的序列如下表所示:

WELL检测的基因反向引物正向引物延伸引物
W1HPA-16wSEQ ID No:1SEQ ID No:2SEQ ID No:61
W1HPA-27bwSEQ ID No:3SEQ ID No:4SEQ ID No:62
W1HPA-1SEQ ID No:5SEQ ID No:6SEQ ID No:63
W1HPA-17wSEQ ID No:7SEQ ID No:8SEQ ID No:64
W1HPA-7wSEQ ID No:9SEQ ID No:10SEQ ID No:65
W1HPA-8wSEQ ID No:11SEQ ID No:12SEQ ID No:66
W1HPA-14wSEQ ID No:13SEQ ID No:14SEQ ID No:67
W1HPA-24bwSEQ ID No:15SEQ ID No:16SEQ ID No:68
W1HPA-26bwSEQ ID No:17SEQ ID No:18SEQ ID No:69
W1HPA-15SEQ ID No:19SEQ ID No:20SEQ ID No:70
W1HPA-21wSEQ ID No:21SEQ ID No:22SEQ ID No:71
W1HPA-22bwSEQ ID No:23SEQ ID No:24SEQ ID No:72
W1HPA-28bwSEQ ID No:25SEQ ID No:26SEQ ID No:73
W1HPA-6_1SEQ ID No:27SEQ ID No:28SEQ ID No:74
W1HPA-13wSEQ ID No:29SEQ ID No:30SEQ ID No:75
W1HPA-23bwSEQ ID No:31SEQ ID No:32SEQ ID No:76
W1HPA-18wSEQ ID No:33SEQ ID No:34SEQ ID No:77
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W2HPA-12wSEQ ID No:59SEQ ID No:60SEQ ID No:90

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