[发明专利]气相色谱检测富马酸丙酚替诺福韦中三乙胺的方法

说明书

本发明公开了气相色谱检测富马酸丙酚替诺福韦中三乙胺的方法，采用气相色谱法分别对富马酸丙酚替诺福韦供试品溶液及对照品溶液进行检测，记录二者的色谱图并获得所述富马酸丙酚替诺福韦供试品溶液及对照品溶液中三乙胺的峰面积，并以外标法对供试品溶液中的三乙胺进行定量分析；本发明采用Agilent 7890B气相色谱仪配Agilent 7697A顶空进样器；色谱柱为Agilent CP‑Volamines(30×0.32mm)，溶剂中加入氢氧化钠溶液(300mg/ml)0.3ml以避免富马酸丙酚替诺福韦中的富马酸对三乙胺检测产生干扰，从而有效准确地对残留溶剂三乙胺进行检测。

技术领域

本发明涉及药物分析技术领域，特别是气相色谱检测富马酸丙酚替诺福韦中三乙胺的方法。

背景技术

富马酸丙酚替诺福韦，化学名为L-丙氨酸-[N-[(S)-[[(1R)-2-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-1-甲基乙氧基]甲基]苯氧基磷酰氧基]]-1-甲基乙基酯,(2E)-2-丁烯二酸盐(2：1)，其化学结构如下：

富马酸丙酚替诺福韦是替诺福韦的第二代口服前体药物，在替诺福韦结构的基础上变换了磷酸中二个羟基上的前药基团，即将二吡呋酯变换为一个酰胺和一个苯酚酯，是一种酯化酰胺化前药。该改构克服了替诺福韦二吡呋酯在血浆中不稳定、易被酯酶水解的缺点，进而提高了替诺福韦至肝细胞、外周血单核细胞(PBMC)和淋巴器官的递送率，达到了明显的减毒增效的效果，其有效剂量比TDF低约25倍。

三乙胺为富马酸丙酚替诺福韦合成过程中采用的溶剂，由于富马酸丙酚替诺福韦结构中存在富马酸，会对样品中三乙胺的检测产生干扰，因此本研究建立了一种气相色谱(顶空进样)检测富马酸丙酚替诺福韦中三乙胺的方法，可有效避免富马酸对三乙胺检测的干扰，灵敏度高、专属性强、准确度高。

发明内容

本发明的目的是为了解决上述问题，提供一种操作简单、结果准确、灵敏度高的测定富马酸丙酚替诺福韦中三乙胺的方法。

实现上述目的本发明的技术方案为，气相色谱检测富马酸丙酚替诺福韦中三乙胺的方法，采用气相色谱法分别对富马酸丙酚替诺福韦供试品溶液及对照品溶液进行检测，记录二者的色谱图，并获得所述富马酸丙酚替诺福韦供试品溶液及对照品溶液中三乙胺的峰面积，并以外标法对富马酸丙酚替诺福韦中的三乙胺进行定量分析。

作为测定富马酸丙酚替诺福韦中三乙胺的方法的进一步描述，本发明以N,N-二甲基甲酰胺为溶解样品的溶剂，并加入氢氧化钠溶液(300mg/ml)0.3ml以预先中和样品结构中的富马酸。

作为测定富马酸丙酚替诺福韦中三乙胺的方法的进一步描述，空白溶液的配制：精密量取1ml N,N-二甲基甲酰胺置20ml顶空瓶中，加入氢氧化钠溶液(300mg/ml)0.3ml，密封。

作为测定富马酸丙酚替诺福韦中三乙胺的方法的进一步描述，对照品溶液的配制：取三乙胺适量，精密称定，加N,N-二甲基甲酰胺溶解并稀释制成每1ml中约含三乙胺500μg的溶液，精密量取1ml，置20ml顶空瓶中，加氢氧化钠溶液(300mg/ml)0.3ml，密封。

作为测定富马酸丙酚替诺福韦中三乙胺的方法的进一步描述，供试品溶液的配制：精密称取供试品0.1g，置20ml顶空瓶中，加N,N-二甲基甲酰胺1ml溶解，再加0.3ml氢氧化钠溶液(300mg/ml)，密封。