[发明专利]一种检测绵羊ZNF280BY基因拷贝数变异的方法及其应用

权利要求书

1.一种检测湖羊ZNF280BY基因拷贝数变异的方法在湖羊公羊分子标记辅助选择育种中的应用，其特征在于：所述的ZNF280BY基因的拷贝数与公羊繁殖性状显著负相关;

所述检测湖羊ZNF280BY基因拷贝数变异的方法，包括以下步骤：

以湖羊公羊基因组DNA模板，以引物对P1以及引物对P2为引物，分别通过实时定量PCR扩增ZNF280BY基因以及作为参照的DDX3Y基因的部分片段，然后根据定量结果鉴定ZNF280BY基因的拷贝数；

所述的引物对P1为：

上游引物F1：5’-GAAAACCCACACCACCTGCC-3’

下游引物R1：5’-GATCTGTAACTGCAAACCTGG-3’

所述的引物对P2为：

上游引物F2：5’-TCGCCGCTTGCTTACGTACACT-3’

下游引物R2：5’-ACACCCTCTGGTTAACGGCCAT-3’。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述的ZNF280BY基因的拷贝数变异区域位于湖羊ZNF280BY基因CDS序列的1016位至1234位。

3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：基于引物对P1扩增的PCR产物片段大小为219bp，基于引物对P2扩增的PCR产物片段大小为136bp。

4.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述的实时定量PCR的扩增体系包括5ng/μL模板DNA 1μL，及10μmol/L的引物对P1或引物对P2所对应的上、下游引物各0.5μL。

5.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述的实时定量PCR的扩增反应程序为：94℃预变性3min；94℃变性15s，69℃退火30s，72℃延伸20s，40个循环；72℃延伸5min。

6.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述的繁殖性状选自睾丸重量和睾丸体积。