[发明专利]一种人胚胎干细胞的构建方法有效
| 申请号： | 202010290822.3 | 申请日： | 2020-04-14 |
| 公开（公告）号： | CN113528448B | 公开（公告）日： | 2023-01-24 |
| 发明（设计）人： | 章小清;刘玲 | 申请（专利权）人： | 同济大学 |
| 主分类号： | C12N5/10 | 分类号： | C12N5/10;C12N15/62;C12N15/867;C07K19/00;C07K14/74;C12R1/91 |
| 代理公司： | 上海光华专利事务所(普通合伙) 31219 | 代理人： | 严晨;许亦琳 |
| 地址： | 200092 *** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 胚胎 干细胞 构建 方法 | ||
1.一种人胚胎干细胞的构建方法，所述构建方法包括：将人胚胎干细胞的基因组中整合外源的编码B2M-HLA-G1融合蛋白的多核苷酸，所述B2M-HLA-G1融合蛋白包括第一B2M片段和HLA-G1片段，整合获得的人胚胎干细胞不表达游离的B2M蛋白；将人胚胎干细胞的基因组中整合外源的编码B2M-HLA-G5融合蛋白的多核苷酸，所述B2M-HLA-G5融合蛋白包括第二B2M片段和HLA-G5片段，所述将人胚胎干细胞的基因组中整合外源的编码B2M-HLA-G5融合蛋白的多核苷酸的方法具体包括：通过慢病毒载体将编码B2M-HLA-G5融合蛋白的多核苷酸整合入人胚胎干细胞的基因组；所述B2M-HLA-G1融合蛋白氨基酸序列如SEQ ID No. 4所示；所述B2M-HLA-G5融合蛋白氨基酸序列如SEQ ID No. 8所示。
2.如权利要求1所述的构建方法，其特征在于，将人胚胎干细胞的基因组中整合外源的编码B2M-HLA-G1融合蛋白的多核苷酸的方法具体包括：将HLA-G1片段的编码基因与人胚胎干细胞中内源性的B2M基因融合。
3.如权利要求2所述的构建方法，其特征在于，将人胚胎干细胞的基因组中整合外源的编码B2M-HLA-G1融合蛋白的多核苷酸的方法具体包括：将HLA-G1片段的编码基因替换位于内源B2M基因外显子3中的终止密码子。
4.一种人胚胎干细胞，由如权利要求1-3任一权利要求所述的人胚胎干细胞的构建方法构建获得。
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