[发明专利]一种球孢白僵菌菌粉的制备及其应用方法在审
申请号: | 202010291805.1 | 申请日: | 2020-04-14 |
公开(公告)号: | CN111676142A | 公开(公告)日: | 2020-09-18 |
发明(设计)人: | 张家韬;崔传斌;陈超;董绘阳;王安然;王平平;任广伟;韩猛;安德荣 | 申请(专利权)人: | 中国烟草总公司陕西省公司 |
主分类号: | C12N1/14 | 分类号: | C12N1/14;A01N63/30;A01P7/04;C12R1/645 |
代理公司: | 北京国坤专利代理事务所(普通合伙) 11491 | 代理人: | 赵红霞 |
地址: | 710061 陕西*** | 国省代码: | 陕西;61 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 球孢白僵菌菌粉 制备 及其 应用 方法 | ||
1.一种球孢白僵菌菌粉的制备方法,其特征在于包括以下步骤:
SS01对所述球孢白僵菌进行一级种子培养;
SS02对所述球孢白僵菌进行二级种子培养;
SS03对所述球孢白僵菌进行三级种子培养;
SS04将三级种子培养所得种子液接种至固体培养基,接种量为20%,进行固体发酵,当固体培养基中球孢白僵菌活孢子数≥20亿/ml时,停止发酵,得到菌粉中间物;
SS05将菌粉中间物在25℃温度下自然风干,风干后对其进行粉碎,粉碎至70目大小,即可获得球孢白僵菌菌粉。
2.根据权利要求1所述的一种球孢白僵菌菌粉的制备方法,其特征在于,所述一级种子培养、二级种子培养和三级种子培养均采用发酵培养基,所述发酵培养基由以下重量百分比的原料组成:
大米粉0.8%-1.0%、葡萄糖1.2%-1.5%、蔗糖1.6%-2%、黄豆饼粉2.7%-3.0%、蚕蛹粉0.6%-1.2%、酵母粉0.9%-1.3%、磷酸二氢钾0.015%-0.03%、硫酸镁0.007%-0.01%、氯化钙0.016%-0.02%。
3.根据权利要求1所述的一种球孢白僵菌菌粉的制备方法,其特征在于,所述一级种子培养、二级种子培养和三级种子培养均采用搅拌机,所述搅拌机转速为160rpm/min。
4.根据权利要求1所述的一种球孢白僵菌菌粉的制备方法,其特征在于,所述一级种子培养、二级种子培养和三级种子培养通气量和温度控制如下:
0-24h时间范围内:气液比为0.5:1、温度为27℃;
24h~48h时间范围内:气液比为1:1、温度为26℃;
48h~60h时间范围内:气液比为1.1:1、温度为26℃。
5.根据权利要求1所述的一种球孢白僵菌菌粉的制备方法,其特征在于,所述固体培养基由以下重量百分比的原料制成:
大米4%-5%、玉米粉2.5%-3%、葡萄糖0.5%-1%、谷壳1.6%-2%、麦麸2.7%-3%、蚕蛹粉0.8%-1%、豆饼粉1.7%-2%,余量为水。
6.根据权利要求1所述的一种球孢白僵菌菌粉的制备方法,其特征在于,所述固态发酵中换气量、温度和湿度控制如下:
0~24h时间范围内:换气量为0.3:1、温度为28℃、湿度为55%;
24-48h时间范围内:换气量为0.5:1、温度为28℃、湿度为60%;
48h以后:换气量为0.6:1、温度为27℃、湿度为45%。
7.如权利要求1-6任意一所述的一种球孢白僵菌菌粉的应用方法,其特征在于,包括以下步骤:
将球孢白僵菌菌粉和水以1:150的比例混合后充分摇匀,再对烟草地土壤进行使用,每隔3天对土壤内部的小地老虎数量和烟草植株上虫孔的数量进行一次统计调查。
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