[发明专利]一种球孢白僵菌菌粉的制备及其应用方法

说明书

本发明公开了一种球孢白僵菌菌粉的制备及其应用方法，涉及微生物技术领域。本发明包括以下步骤：对球孢白僵菌进行一级种子培养，对球孢白僵菌进行二级种子培养，对球孢白僵菌进行三级种子培养，将三级种子培养所得种子液接种至固体培养基，接种量为20％，进行固体发酵，当固体培养基中球孢白僵菌活孢子数≥20亿/ml时，停止发酵，得到菌粉中间物，将菌粉中间物在25℃温度下自然风干，风干后对其进行粉碎，粉碎至70目大小，即可获得球孢白僵菌菌粉，本发明针对小地老虎具有明显的致死功效，可提高防治率，同时球孢白僵菌菌粉为绿色无污染的生物杀虫剂，不会破坏烟草种植地的土壤结构，可以保障烟草种植地能够长久循环使用。

技术领域

本发明涉及微生物技术领域，具体为一种球孢白僵菌菌粉的制备及其应用方法。

背景技术

烟草属于茄科烟草属植物，一种重要经济作物，其产物烟叶是卷烟商品的主要生产原料；烟草对温度的反应比较敏感，不同的温度条件对烟草的品质、产量影响比较大；烟草种植地中的小地老虎会啃食烟草植株，若小地老虎数量增多则必会影响烟叶的产量，因此需要杀虫手段对烟草种植地进行防治，抑制小地老虎的数量。

市面上化学杀虫剂并不是针对小地老虎研发的，所以导致杀虫剂的杀虫效果并不明显，而且化学杀虫剂容易破坏土壤结构，从而影响烟草的生长，因此研发一种专门针对小地老虎的球孢白僵菌菌粉制备和应用方法是本领域技术人员需要解决的技术问题。

发明内容

针对现有技术的不足，本发明提供了一种球孢白僵菌菌粉的制备及其应用方法，解决了上述背景技术中提出的问题。

为实现以上目的，本发明通过以下技术方案予以实现：一种球孢白僵菌菌粉的制备方法，包括以下步骤：

SS01对所述球孢白僵菌进行一级种子培养；

SS02对所述球孢白僵菌进行二级种子培养；

SS03对所述球孢白僵菌进行三级种子培养；

SS04将三级种子培养所得种子液接种至固体培养基，接种量为20％，进行固体发酵，当固体培养基中球孢白僵菌活孢子数≥20亿/ml时，停止发酵，得到菌粉中间物；

SS05将菌粉中间物在25℃温度下自然风干，风干后对其进行粉碎，粉碎至70目大小，即可获得球孢白僵菌菌粉。

进一步地，所述一级种子培养、二级种子培养和三级种子培养均采用发酵培养基，所述发酵培养基由以下重量百分比的原料组成：

大米粉0.8％-1.0％、葡萄糖1.2％-1.5％、蔗糖1.6％-2％、黄豆饼粉2.7％-3.0％、蚕蛹粉0.6％-1.2％、酵母粉0.9％-1.3％、磷酸二氢钾0.015％-0.03％、硫酸镁0.007％-0.01％、氯化钙0.016％-0.02％。

进一步地，所述一级种子培养、二级种子培养和三级种子培养均采用搅拌机，所述搅拌机转速为160rpm/min。

进一步地，所述一级种子培养、二级种子培养和三级种子培养通气量和温度控制如下：

0-24h时间范围内：气液比为0.5:1、温度为27℃；

24h～48h时间范围内：气液比为1:1、温度为26℃；

48h～60h时间范围内：气液比为1.1:1、温度为26℃。

进一步地，所述固体培养基由以下重量百分比的原料制成：

大米4％-5％、玉米粉2.5％-3％、葡萄糖0.5％-1％、谷壳1.6％-2％、麦麸2.7％-3％、蚕蛹粉0.8％-1％、豆饼粉1.7％-2％，余量为水。

进一步地，所述固态发酵中换气量、温度和湿度控制如下：