[发明专利]一种二价铁荧光探针及其应用在审
| 申请号： | 202010295000.4 | 申请日： | 2020-04-15 |
| 公开（公告）号： | CN112209877A | 公开（公告）日： | 2021-01-12 |
| 发明（设计）人： | 杨永刚;甘翠芬;许玫英;罗业燊 | 申请（专利权）人： | 广东省微生物研究所（广东省微生物分析检测中心） |
| 主分类号： | C07D221/14 | 分类号： | C07D221/14;C09K11/06;C12Q1/04;G01N15/14;G01N21/64 |
| 代理公司： | 广州科粤专利商标代理有限公司 44001 | 代理人： | 朱双;刘明星 |
| 地址： | 510070 广东省广*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 二价 荧光 探针 及其 应用 | ||
1.一种二价铁荧光探针，其特征在于，其结构式如式I所示：
2.权利要求1所述的二价铁荧光探针在鉴别和筛选具有铁还原活性的微生物中的应用。
3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，包括以下步骤：
培养并收集待鉴定微生物菌体，用PBS缓冲液洗涤后接种到含有3mM柠檬酸铁的无机盐培养基中厌氧培养7h以上，加入终浓度为50μM的所述的二价铁荧光探针培养15min，然后用激光共聚焦扫描显微镜观察荧光进行鉴定。
4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述的激光共聚焦扫描显微镜使用激发波长为488nm，发射波长为530nm；观察到的荧光强度越强表示微生物的铁还原能力越强。
5.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，包括以下步骤：
培养并收集待鉴定微生物菌体，用PBS缓冲液洗涤后接种到含有3mM柠檬酸铁的无机盐培养基中厌氧培养8h以上，加入终浓度为50μM的所述的二价铁荧光探针培养15min，然后利用流式细胞仪进行筛选。
6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述的利用流式细胞仪进行筛选，是使用Sysmex Partec CyFlow Cube 6流式细胞仪的FL1检测器：激发波长为488nm，发射波长为536/40nm；在488nm激发波长下激发，流量是50μL/min，运行2min，信号收集通道选用DsRed通道。
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