[发明专利]一种提高脐带间充质干细胞的体外扩增速率的培养方法有效
申请号: | 202010297310.X | 申请日: | 2020-04-15 |
公开(公告)号: | CN111394306B | 公开(公告)日: | 2023-08-01 |
发明(设计)人: | 耿倚云;宋芸娟;胡士庶;沈洁;沈艳 | 申请(专利权)人: | 深圳市旷逸生物科技有限公司 |
主分类号: | C12N5/0775 | 分类号: | C12N5/0775;C12N5/02 |
代理公司: | 深圳市合道英联专利事务所(普通合伙) 44309 | 代理人: | 廉红果 |
地址: | 518000 广东省深圳市前海深港合作区前*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 提高 脐带 间充质 干细胞 体外 扩增 速率 培养 方法 | ||
1.一种提高脐带间充质干细胞的体外扩增速率的培养方法,其特征在于,该方法包括如下步骤:
S1、向MSCBM-NP培养基中加入MSC无血清添加剂EliteGroTM-Advanced,配制得到完全培养基;
所述添加剂EliteGroTM-Advanced与所述MSCBM-NP培养基的体积比为(1.5~2.5):100;
S2、采用所述S1的完全培养基将脐带间充质干细胞冲悬,得到细胞悬液;脐带间充质干细胞为P1代~P6代的脐带间充质干细胞;
S3、调整所述细胞悬液中的细胞密度为1×106~5×106个/mL,将所述细胞悬液接种于细胞培养设备中;所述细胞培养设备为细胞培养板或细胞培养瓶,接种于所述细胞培养板或细胞培养瓶中的细胞密度为0.6×104~1.2×104个/cm2;
S4、将所述S3的细胞培养设备置于培养箱中进行脐带间充质干细胞的扩增培养。
2.如权利要求1所述的提高脐带间充质干细胞的体外扩增速率的培养方法,其特征在于,在所述S1中,所述添加剂EliteGroTM-Advanced与所述MSCBM-NP培养基的体积比为2:100。
3.如权利要求1所述的提高脐带间充质干细胞的体外扩增速率的培养方法,其特征在于,在所述S4中,所述培养箱为CO2培养箱,培养温度为35℃~38℃,CO2的体积百分浓度为4.5%~5.5%。
4.如权利要求3所述的提高脐带间充质干细胞的体外扩增速率的培养方法,其特征在于,培养温度为37℃,CO2的体积百分浓度为5%。
5.如权利要求1-4任一项所述的提高脐带间充质干细胞的体外扩增速率的培养方法,其特征在于,所述MSCBM-NP培养基购买于Dakewe公司,货号为6114021。
6.如权利要求1-4任一项所述的提高脐带间充质干细胞的体外扩增速率的培养方法,其特征在于,所述EliteGroTM-Advanced购买于Elite Cell公司,货号为EPA-050。
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