[发明专利]一种提高脐带间充质干细胞的体外扩增速率的培养方法

说明书

本发明属于干细胞培养技术领域，公开了一种提高脐带间充质干细胞的体外扩增速率的培养方法。该方法包括如下步骤：向MSCBM‑NP培养基中加入添加剂EliteGrosupgt;TM/supgt;‑Advanced，配制得到完全培养基；添加剂EliteGrosupgt;TM/supgt;‑Advanced与MSCBM‑NP培养基的体积比为(1.5～2.5)：100；采用完全培养基将脐带间充质干细胞冲悬，得到细胞悬液；调整细胞悬液中的细胞密度，将细胞悬液接种于细胞培养设备中；将细胞培养设备置于培养箱中培养进行扩增培养。本发明的培养方法能够增加脐带间充质干细胞的细胞增殖速率；在细胞未在孔内长满的前提下，随着培养时间的延长，增殖速率并不会随之下降。

技术领域

本发明属于干细胞培养技术领域，具体涉及一种提高脐带间充质干细胞的体外扩增速率的培养方法。

背景技术

脐带间充质干细胞(umbilical cord mesenchymal stem cells,UC-MSCs)是一种具有自我更新能力和多向分化潜能的间充质干细胞，其来源于人脐带华通氏胶组织。由于脐带间充质干细胞及其分泌的细胞因子具有抑制炎症的作用，且在特定条件下能分化成多种成体细胞，所以可以应用于临床中急性损伤、慢性炎症、退行性疾病及受损组织的再生修复，用途广泛且用量较大，临床使用对该细胞的大量扩增有迫切需求。

由于脐带间充质干细胞体外扩增速率的限制，进而限制了大规模市场化应用的可行性。找到可以更快、更多扩增脐带间充质干细胞，且同时能保持脐带间充质干细胞的细胞形态和功能，并能符合临床应用条件的培养方法是当前研究的热点。

发明内容

有鉴于此，为了解决目前的脐带间充质干细胞的体外培养方法无法实现更快的培养细胞的问题，本发明提供一种提高脐带间充质干细胞的体外扩增速率的培养方法。

本发明采用如下方案实现：

一种提高脐带间充质干细胞的体外扩增速率的培养方法，该方法包括如下步骤：

S1、向MSCBM-NP培养基中加入MSC无血清添加剂EliteGro^TM-Advanced，配制得到完全培养基；

所述添加剂EliteGro^TM-Advanced与所述MSCBM-NP培养基的体积比为(1.5～2.5)：100；

S2、采用所述S1的完全培养基将脐带间充质干细胞冲悬，得到细胞悬液；

S3、调整所述细胞悬液中的细胞密度，将所述细胞悬液接种于细胞培养设备中；

S4、将所述S3的细胞培养设备置于培养箱中进行脐带间充质干细胞的扩增培养。

其中MSCBM-NP培养基是无酚红MSC基础培养基。

优选的，在所述S1中，所述添加剂EliteGro^TM-Advanced与所述MSCBM-NP培养基的体积比为2：100。

优选的，在所述S2中，采用的脐带间充质干细胞为P1代～P6代的脐带间充质干细胞。即说明在具体实验过程中，采用的脐带间充质干细胞可以为P1代的脐带间充质干细胞，也可以为P6代的脐带间充质干细胞，也可以为P2代、P3代、P4代或P5代的脐带间充质干细胞。

优选的，在所述S3中，所述细胞悬液中的细胞密度为1×10⁶～5×10⁶个/mL。