[发明专利]一株氯羟吡啶单克隆抗体杂交瘤细胞株TYL及其应用

权利要求书

1.一株氯羟吡啶单克隆抗体杂交瘤细胞株TYL，已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心CGMCC，地址北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所，分类命名为单克隆细胞株，保藏日期2019年10月14日，保藏编号CGMCC No.18520。

2.氯羟吡啶单克隆抗体，其特征在于：它由权利要求1所述保藏编号为CGMCC No.18520的氯羟吡啶单克隆抗体杂交瘤细胞株TYL分泌产生。

3.用于制备权利要求1所述氯羟吡啶单克隆抗体杂交瘤细胞株TYL的免疫原氯羟吡啶-BSA的制备方法，其特征是步骤如下：

（1）氯羟吡啶半抗原的制备：称取1920mg的氯羟吡啶完全溶解于25mL的0.5mol/L的NaOH溶液中，通过真空蒸馏将水除去；然后用水洗涤并用氮气吹干至室温后，将初级产物溶解于20mL的N，N-二甲基甲酰胺DMF溶液中，然后加入0.6mL溴乙酸乙酯；在60℃下反应4h后，冷却至室温，再将200mL的蒸馏水加入其中，并将该混合物在4℃的冰箱中冷却过夜；再通过去离子水冲洗抽滤后，得到含有酯键的氯羟吡啶衍生物；向该产物中加入20mL蒸馏水，然后加热至85℃；接着，再将0.5mol/L的NaOH溶液逐滴加入，直到所有的固体完全溶解；再冷却至室温后，用1mol/L的HCl溶液将pH调节至4；将反应混合物贮存于4℃过夜；最后，再通过过滤、重结晶和干燥三个步骤来获得氯羟吡啶半抗原；

（2）免疫原氯羟吡啶-BSA的制备：称取1.66 mg步骤（1）制备所得氯羟吡啶半抗原，将其溶解在600μL DMF中，然后加入3.17 mg EDC，2.28 mg NHS，该混合物在室温搅拌6 h，得到反应液A；称取5 mg BSA，溶解于0.1 M硼酸盐缓冲液中，得到溶液B；随后，逐滴将反应液A液加入到溶液B液中，室温反应8h，即得偶联物氯羟吡啶-BSA混合液，通过透析分离完全抗原和未偶联的小分子半抗原，得到免疫原氯羟吡啶-BSA。

4.权利要求2所述氯羟吡啶单克隆抗体的应用，其特征在于：建立氯羟吡啶含量的免疫检测方法，应用于食品中氯羟吡啶的检测。

5.根据权利要求4所述氯羟吡啶单克隆坑体的应用，其特征在于：所述检测领域为鸡肉和其他含有氯羟吡啶的食品。