[发明专利]一种茶藨子木层孔菌苯乙烯基吡喃酮衍生物及其制备方法和应用

说明书

本发明涉及医药技术领域，具体涉及一种茶藨子木层孔菌苯乙烯基吡喃酮衍生物及其制备方法和应用。本发明从茶藨子木层孔菌的甲醇浸提物中分离出一种新的苯乙烯基吡喃酮衍生物茶藨子木层孔菌素B，阐明了它们的结构，该化合物为首次报道。茶藨子木层孔菌素B(PRB)是从药用真菌茶藨子木层孔菌(Phellinusribis)中分离获得的具有免疫抑制作用的小分子化合物，研究表明其在1、2、4μM浓度下能够显著抑制ConA诱导的脾淋巴细胞增殖，其机制与抑制脾淋巴细胞因子IL‑2和IFN‑γ有关，可望开发免疫抑制剂类药物。

技术领域

本发明涉及医药技术领域，具体涉及一种茶藨子木层孔菌苯乙烯基吡喃酮衍生物及其制备方法和应用。

背景技术

自身性免疫疾病和器官移植手术后的排斥反应的治疗是当前医学上面临的难题之一，目前临床上应用的免疫抑制药物如环孢素A、他克莫司、雷帕霉素、霉酚酸脂等，均具有不同程度的肝肾毒性或神经毒性，长期服用会引起高脂血症、代谢性骨病甚至诱发肿瘤的发生；同时，这些免疫抑制药物的价格也比较昂贵。

近年来，天然药物以其资源丰富、作用方式独特、效果良好、不易产生耐药性等而成为一种理想药物的选择。已有大量的研究表明，天然来源的药物能够促进正常免疫器官发育和受损免疫器官的康复，使机体免疫功能恢复和增强；能够抑制或者促进淋巴细胞增殖分化，调节机体细胞免疫和体液免疫的应答反应；抑制或促进细胞分泌的多种细胞因子，进而达到抑制或促进免疫细胞的分化和活化，发挥调节免疫功能效应。因此，从天然药物中寻找低毒、有效、价格低廉的免疫抑制药物成为当今医药界追寻的目标。

发明内容

本发明从茶藨子木层孔菌中发现了一种烯基衍生物，其化学结构式为：

茶藨子木层孔菌素B(PRB)是从药用真菌茶藨子木层孔菌(Phellinus ribis)中分离获得的具有免疫抑制作用的小分子化合物，研究表明其在1、2、4μM浓度下能够显著抑制ConA诱导的脾淋巴细胞增殖，其机制与抑制脾淋巴细胞因子IL-2和IFN-γ有关，可望开发免疫抑制剂类药物。PRB结构新颖，是首次分离得到，为新化合物；关于茶藨子木层孔菌素B免疫抑制的研究在本发明完成之前没有报道。

本发明所述的茶藨子木层孔菌烯基衍生物的制备方法，包括以下步骤：

(1)茶藨子木层孔菌子实体粉末在室温下用甲醇冷浸提取一个月，过滤并浓缩后，获得茶藨子木层孔菌浸提物；

(2)浸提物经硅胶柱色谱纯化，依次用二氯甲烷、二氯甲烷-乙酸乙酯、乙酸乙酯、乙酸乙酯-甲醇梯度洗脱得到七个组分A-G；

(3)组分C经Sephadex LH-20色谱柱，甲醇洗脱，得到八个组分C1-C8；

(4)C5上硅胶柱，使用二氯甲烷-甲醇洗脱，获得四个组分C5a-C5d；

(5)组分C5c通过反相HPLC(Cosmosil 5C18-MSII)制备液相，甲醇-水洗脱，获得化合物茶藨子木层孔菌素B，即PRB。

步骤(1)中茶藨子木层孔菌子实体粉末与甲醇的质量体积比为0.36g/ml。

步骤(2)中二氯甲烷-乙酸乙酯中二氯甲烷与乙酸乙酯的体积比的体积比依次为A:100:0、B:9:1、C:1:1、D:0:100；乙酸乙酯-甲醇中乙酸乙酯与甲醇的体积比依次为E:9:1、F:7:3、G:1:1。

步骤(4)中二氯甲烷与甲醇的体积比为20：1.

步骤(5)中甲醇与水的体积比为65：35。

将本发明所述的化合物应用于对ConA诱导脾淋巴细胞增殖试验，研究表明其在1、2、4μM浓度下能够显著抑制ConA诱导的脾淋巴细胞增殖，其机制与抑制脾淋巴细胞因子IL-2和IFN-γ有关，可望开发免疫抑制剂类药物。