[发明专利]犬细小病毒检测试剂盒

说明书

本发明涉及犬细小病毒检测试剂盒，所述试剂盒由20支PCR反应管、300μl PCR反应混合物、2.0g琼脂糖、100μl溴化乙锭10μg/μl、0.25％溴酚蓝点样缓冲液100μl、5μl Taq酶(5U/μl)组成，其中PCR反应混合物包含引物序列Primer1:F 5’‑CCAACCATACCAACTCCAT‑3’，R 5’‑CTTGTGTAGACGCCTCAA‑3’或Primer2:F 5’‑GGAGCAGTTCAACCAGAC‑3’，R 5’‑GCATCAACCAATGACCAAG‑3’，所述试剂盒的有益效果为引物序列高度保守，可以检测不同来源，突变的犬细小病毒，可以更好的应对犬细小病毒突变。

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体涉及犬细小病毒检测试剂盒。

背景技术

犬细小病毒病是由犬细小病毒(Canine parvovirus,CPV)引起的一种急性、烈性传染病，临床上以呕吐、非化脓性心肌炎或出血性肠炎为特征。1978年，Appel等人首次从患有肠炎的病犬体内分离获得该病毒，该病发病急、死亡率高，随着全球经济的快速增长，生活水平不断提高，宠物的饲养量也日益剧增，CPV给养犬业造成极大损失，严重危害了养犬业的健康发展，引起国内外不少专家的关注。

CPV属于细小病毒科细小病毒属成员，猫泛白细胞减少症病毒(FelinePanleucopen ia virus,FPV)、浣熊细小病毒(Raccoon parvovirus,RPV)、貂肠炎病毒(Mink enter itis virus,MEV)、蓝狐细小病毒(Blue fox parvovirus,BFPV)、阿留申病毒(Aleutian di sease virus,ADV)均与其同属，该病毒对外界理化环境有非常强的抵抗力，游离于粪便中也能存活数月至数年，在pH3.0-9.0条件下，即使在65℃水浴30min也不丧失感染活性，对乙醚、氯仿等抵抗力较强，即使被这些物质处理过，也不会影响其感染特性和血凝特性，在室温环境下放置90d，也只是对其感染性产生轻度影响。CPV粒子无囊膜，直径为20-22nm，二十面体对称结构，基因组为单链DNA，大小为5233bp，主要编码VP1、VP2两种结构蛋白和NS1、NS2两种非结构蛋白，CPV的衣壳由VP1和VP2两种蛋白构成，其中VP2为主要成分，VP2与VP1的部分氨基酸存在重叠，且终止于同一密码子，在CPV的感染过程中起着非常重要的作用，若缺失两种蛋白中的任何一个，则CPV将不能再次感染其他宿主细胞，CPV主要易感动物是犬，对不同性别、年龄犬均具有易感性，偶尔也感染狼、貂、狐等其他犬科或鼠鼬科动物，该病绝大多数年龄以及很多品种的犬都可以感染，该病一年四季都可发生，无明显季节性，2-6月份发病则相对比较集中，犬感染CPV后3-4d即开始排毒，此时的CPV感染性最强，7-10d后，病毒的感染力和血凝性大幅度降低甚至丧失，CPV主要是经消化道途径进入机体，引起发病，但对于特定毒株，发病犬的症状一般较轻，但经过与其它病原微生物产生系统作用，往往会出现较为严重的临床症状，犬细小病毒之所以广为流行，其中最重要的原因之一就是患病犬康复后，仍可长期排毒。