[发明专利]一种捕获水蛭素类多肽的探针及其应用有效
申请号: | 202010302526.0 | 申请日: | 2020-04-16 |
公开(公告)号: | CN111440235B | 公开(公告)日: | 2022-11-25 |
发明(设计)人: | 曹秀君;国锦琳;聂应;罗莎杰;张佳斌 | 申请(专利权)人: | 成都中医药大学 |
主分类号: | C07K14/815 | 分类号: | C07K14/815;C07K1/14;G01N33/68 |
代理公司: | 成都高远知识产权代理事务所(普通合伙) 51222 | 代理人: | 李高峡;张娟 |
地址: | 610000 四川*** | 国省代码: | 四川;51 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 捕获 水蛭 多肽 探针 及其 应用 | ||
1.一种分离水蛭素类多肽的方法,其特征在于:所述方法是使用探针从溶液中分离水蛭素类多肽的方法;所述探针由磁性固相载体、凝血酶配基和凝血酶组成;所述磁性固相载体为以磁性物质为核心,外层包覆了聚合物或生物大分子的磁珠;
其中磁珠与凝血酶配基通过位于磁性固相载体表面的活性基团进行共价或非共价化学连接;
凝血酶配基与凝血酶进行非共价化学连接;所述凝血酶配基的核苷酸序列如SEQ IDNO.7或8所示。
2.如权利要求1所述的方法,其特征在于:所述磁性固相载体为:聚苯乙烯磁珠、琼脂糖磁珠、二氧化硅磁珠、MOF金磁珠、MOF汞磁珠或MOF铅磁珠。
3.如权利要求1所述的方法,其特征在于:所述活性基团是羧基或活化羧基、氨基、巯基、甲苯磺酸基或环氧基;
或,所述活性基团为链霉亲和素、生物素或吡啶二硫化物。
4.如权利要求1所述的方法,其特征在于:所述磁性固相载体的直径为0.2-25μm。
5.如权利要求1所述的方法,其特征在于:所述水蛭素类多肽为水蛭素、山蛭素、菲牛蛭素或重组水蛭素。
6.如权利要求1-5任一项所述的方法,其特征在于,包括如下步骤:
1)所述探针与水蛭素类多肽接触;
2)将探针与溶液分离;
3)使用三氟乙酸溶液洗脱探针上的水蛭素类多肽。
7.如权利要求6所述的方法,其特征在于:步骤3)的三氟乙酸溶液浓度为0.01M。
8.一种水蛭素类多肽的检测方法,其特征在于:包括如下步骤:取待检样品,用权利要求1~7任一所述的方法对水蛭素类多肽进行分离,再使用色谱法、色谱质谱联用法、凝血酶滴定法、生色底物法、光散射法、纤维蛋白原平板法或凝血酶时间法进行检测。
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