[发明专利]化学耐受性的葡萄糖脱氢酶突变体及其在辅酶再生中的应用有效
| 申请号： | 202010307542.9 | 申请日： | 2020-04-17 |
| 公开（公告）号： | CN111593030B | 公开（公告）日： | 2022-11-08 |
| 发明（设计）人： | 郑高伟;钱雯卓;陈琦;许建和;李春秀;潘江;钱小龙 | 申请（专利权）人： | 华东理工大学;苏州百福安酶技术有限公司 |
| 主分类号： | C12N9/04 | 分类号： | C12N9/04;C12N15/53;C12P19/36 |
| 代理公司： | 上海科盛知识产权代理有限公司 31225 | 代理人： | 褚明伟 |
| 地址： | 200237 *** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 化学 耐受 葡萄糖 脱氢酶 突变体 及其 辅酶 再生 中的 应用 | ||
1.一种葡萄糖脱氢酶突变体，其特征在于，所述葡萄糖脱氢酶突变体的序列为：将如序列表中SEQ ID No. 2所示氨基酸序列的第74位天冬酰胺替换为天冬氨酸，第100位丝氨酸替换为脯氨酸，第111位赖氨酸替换为精氨酸，第166位赖氨酸替换为精氨酸，第194位脯氨酸替换为精氨酸。
2.根据权利要求1所述葡萄糖脱氢酶突变体，其特征在于，所述葡萄糖脱氢酶突变体具有化学耐受性。
3.根据权利要求2所述葡萄糖脱氢酶突变体，其特征在于，所述葡萄糖脱氢酶突变体具有有机溶剂耐受性。
4.根据权利要求3所述葡萄糖脱氢酶突变体，其特征在于，所述有机溶剂包括苯乙醇、二甲基亚砜、甲醇、乙醇和N,N-二甲基甲酰胺。
5.一种分离的核酸，其特征在于，所述核酸编码如权利要求1所述葡萄糖脱氢酶突变体。
6.一种重组表达载体，其特征在于，所述重组表达载体包含如权利要求5所述核酸。
7.一种重组表达转化体，其特征在于，所述重组表达转化体包含如权利要求6所述重组表达载体。
8.一种重组葡萄糖脱氢酶突变体催化剂，其特征在于，所述的重组葡萄糖脱氢酶突变体催化剂是以下形式中的任意一种：
（1）培养如权利要求7所述重组表达转化体，分离含有所述葡萄糖脱氢酶突变体的转化体细胞；
（2）培养如权利要求7所述重组表达转化体，分离含有所述葡萄糖脱氢酶突变体的粗酶液；
（3）培养如权利要求7所述重组表达转化体，分离含有所述葡萄糖脱氢酶突变体的粗酶液，干燥得到的粗酶粉；
（4）如权利要求1所述葡萄糖脱氢酶突变体。
9.一种如权利要求8所述的重组葡萄糖脱氢酶突变体催化剂在催化辅酶NADH和NADPH再生中的应用。
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