[发明专利]标记物引导通用探针检测三种真菌毒素的侧向抗体芯片

权利要求书

1.一种标记物引导通用探针检测三种真菌毒素的侧向抗体芯片，其特征在于，包括衬板、以及依次粘附于衬板上且相邻之间部分叠置的双功能抗原释放垫、通用荧光探针释放垫、层析膜和吸水垫；所述双功能抗原释放垫包含由卵清白蛋白和AFB1、OTA、ZEN分别偶联而成的检测抗原的基础上偶联特定标记物；所述通用荧光探针释放垫包含标记有抗特定标记物抗体的通用荧光探针；所述层析膜设有检测线A、检测线B、检测线C和质控线，所述检测线A、检测线B、检测线C分别固定抗AFB1、抗OTA和抗ZEN抗体，所述质控线固定抗特定标记物抗体。

2.根据权利要求1所述的侧向抗体芯片，其特征在于，所述特定标记物为7-氨基-4-羟基-2-萘磺酸。

3.根据权利要求1所述的侧向抗体芯片，其特征在于，所述双功能抗原释放垫采用玻璃纤维素膜吸收含有三种双功能抗原、表面活性剂、甘露醇、蔗糖的PBS溶液制得。

4.根据权利要求1所述的侧向抗体芯片，其特征在于，所述通用荧光探针释放垫采用人造纤维素膜吸收含有量子点荧光探针、聚乙二醇、甘露醇、蔗糖、甘氨酸的PBS溶液制得。

5.根据权利要求1所述的侧向抗体芯片，其特征在于，所述层析膜采用硝酸纤维素膜；所述检测线A由含有抗AFB1抗体和蔗糖的PBS溶液喷涂在硝酸纤维素膜上制得；所述检测线B由含有抗OTA抗体和蔗糖的PBS溶液喷涂在硝酸纤维素膜上制得；所述检测线C由含有抗ZEN抗体和蔗糖的PBS溶液喷涂在硝酸纤维素膜上制得。

6.根据权利要求1所述的侧向抗体芯片，其特征在于，所述质控线由含有抗7-氨基-4-羟基-2-萘磺酸抗体和蔗糖的PBS溶液喷涂在硝酸纤维素膜上制得。

7.同时检测油料作物三种真菌毒素的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1:制备双功能抗原、通用荧光探针、检测线和质控线；所述三种双功能抗原由卵清白蛋白分别与AFB1、OTA、ZEN偶联之后标记7-氨基-4-羟基-2-萘磺酸，所述通用荧光探针标记有抗7-氨基-4-羟基-2-萘磺酸抗体，所述检测线A固定抗AFB1抗体，检测线B固定抗OTA抗体，检测线C固定抗ZEN抗体；所述质控线固定抗7-氨基-4-羟基-2-萘磺酸抗体；

S2：将样品溶液、三种双功能抗原和通用荧光探针混合，一起输送至检测线A、检测线B、检测线C和质控线，根据三条检测线和质控线的荧光信号判断样品中是否含有AFB1、OTA和ZEN，以及测定三种真菌毒素的浓度。

8.根据权利要求7所述的检测方法，其特征在于，步骤S2通过以下方法进行判断样品中是否含有三种真菌毒素：检测线A、检测线B、检测线C和质控线都显示荧光信号，断定结果为阴性，样品中不含AFB1、OTA和ZEN；检测线A不显示荧光信号，质控线显示荧光信号，断定样品中含有AFB1；检测线B不显示荧光信号，质控线显示荧光信号，断定样品中含有OTA；检测线C不显示荧光信号，质控线显示荧光信号，断定样品中含有ZEN。

9.根据权利要求7所述的检测方法，其特征在于，步骤S2通过以下方法进行测定三种真菌毒素的浓度：质控线的荧光信号强度检测值定义为C值，3条检测线的荧光信号强度检测值分别定义为T1值、T2值、T3值，通过各检测线的T/C比制定标准曲线从而测定具体浓度。

10.根据权利要求7所述的检测方法，其特征在于，所述通用荧光探针在365nm光源激发下，产生630nm的发射光。