[发明专利]一种续断药材加工及含量测定方法、化合物及确认方法

权利要求书

1.一种用于续断药材的含量测定方法，其特征在于，所述含量测定方法用于测定使用以下加工方法而得的续断药材，具体方法为：采挖当天用水冲洗干净，净制除杂，60℃烘至含水量40％后，于25℃发汗5d，60℃烘干；

所述续断药材含量测定方法是利用HPLC法同时测定续断中8个化合物含量，包括以下步骤：对照品溶液的制备、供试品溶液的制备、色谱条件的设定及测定方法；

对照品溶液制备包括以下步骤：取各对照品适量，精密称定，用甲醇溶解，制成1.0520mg/mL川续断皂苷VI、1.0160mg/mL续断苷A、0.9700mg/mL续断苷B、1.2060mg/mL当药苷、1.1090mg/mL马钱甘酸、1.0800mg/mL林生续断苷I、1.0060mg/mL马钱子苷及1.0240mg/mL5-羟甲基-2-呋喃甲醛各对照品储备液；取各对照品储备液适量，精密量取，加甲醇稀释，制成0.1052mg/mL川续断皂苷VI、0.0508mg/mL续断苷A、0.0369mg/mL续断苷B、0.0603mg/mL当药苷、0.0554mg/mL马钱甘酸、0.0540mg/mL林生续断苷I、0.0503mg/mL马钱子苷及0.0512mg/mL 5-羟甲基-2-呋喃甲醛的对照品混合溶液，摇匀，用0.45μm的微孔滤膜滤过，即得检测用混合对照品溶液；

供试品溶液的制备包括以下步骤：取续断样品细粉0.4～0.6g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入20～40％乙醇25mL，密塞，称定重量，浸泡20～40min后，在温度为35℃、功率为250W、频率为40KHz的条件下超声处理20～40min，放冷，再称定重量，用提取溶剂补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液5mL，置25mL容量瓶中，用提取溶剂稀释至刻度，摇匀，用0.45μm的微孔滤膜滤过，即得供试品溶液；

色谱条件的设定及测定方法具体为：色谱条件：以C18为色谱柱，以乙腈为流动相A，0.1％磷酸为流动相B进行梯度洗脱；所述梯度洗脱具体为：0～5min，10％A，90％B；5～12min，10％～13.3％A，90％～86.7％B；12～23min，13.3％A,86.7％B；23～45min，13.3％～37％A，86.7％～63％B；45～55min，37％A，63％B；55～65min，37％～10％A，63％～90％B；65～70min，10％A，90％B；柱温30℃；流速1.0mL/min；进样体积20μL；检测波长：川续断皂苷VI为212nm，续断苷A、续断苷B为230nm，当药苷、马前苷酸、林生续断苷I为237nm，马钱子苷为246nm，5-羟甲基-2-呋喃甲醛为284nm；测定方法：精密吸取混合对照品溶液和续断供试品溶液各20μL，注入液相色谱仪，以外标法计算续断中川续断皂苷VI、续断苷A、续断苷B、当药苷、马钱甘酸、林生续断苷I、马钱子苷、5-羟甲基-2-呋喃甲醛的含量。

2.根据权利要求1所述的含量测定方法，其特征在于，所述供试品溶液的制备包括以下步骤：取续断样品细粉0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入20％乙醇25mL，密塞，称定重量，浸泡30min后，在温度为35℃、功率为250W、频率为40KHz的条件下超声处理30min，放冷，再称定重量，用提取溶剂补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液5mL，置25mL容量瓶中，用提取溶剂稀释至刻度，摇匀，用0.45μm的微孔滤膜滤过，即得供试品溶液。