[发明专利]一种续断药材加工及含量测定方法、化合物及确认方法

说明书

本发明涉及一种续断药材加工及含量测定方法、化合物及确认方法，该加工方法通过烘干、发汗等方法加工而成，建立了通过HPLC法同时测定续断药材中8种化合物含量的方法，并利用HPLC‑ESI‑MS法进一步确定各化合物结构的检测方法及明确化合物特征，提供了全面而精确的续断药材质量评价方法，为研究续断发汗加工方法的科学内涵提供了依据。

技术领域

本发明涉及医药发明领域，具体涉及一种续断药材加工及含量测定方法、化合物及确认方法。

背景技术

续断，中药名，又名和尚头，为川续断科多年生草本植物川续断Dipsacu asperWall.ex Henry的干燥根，因能“续折接骨”而得名，既补肝肾，壮筋骨，又能通能利血脉，流畅气血，消除瘀血肿痛，促进断伤筋骨的生长接续，故为伤科常用之要药。自1977年版至今，中国药典规定续断药材要“发汗”加工后使用。

目前，中国药典主要采用HPLC测定续断药材中的一个化合物川续断皂苷VI，作为续断药材的质量评价指标。但中药具有多成分、多功效的特点，仅以单一成分还不能全面表达中药质量。岳媛等人用HPLC法建立了测定续断中马钱苷酸、马钱苷、当药苷和川续断皂苷VI的含量；冯良用RP-HPLC-ELSD建立了同时测定川续断皂苷X、川续断皂苷VI、川续断皂苷XIII、α-常春藤皂苷4个皂苷类成分；陈璞等用HPLC法检测续断中川续断皂苷VI、马钱苷、当药苷的含量。上述方法对评价续断药材的质量发挥了技术控制作用，但是由于续断药才的化学组分很多，仅测定其中一类成分的多个化合物还不能全面代表药材的多组份和多功效特点，关键是上述方法不能确认各化合物结构。

现有技术“HPLC同时测定续断中7种成分的含量”，马蕙文；易红；李春；张东；田莲超中国实验方剂学杂志2017-12-2，建立HPLC同时测定续断中7种成分(当药苷,马钱苷,马钱苷酸,绿原酸,川续断皂苷Ⅵ,续断苷A和续断苷B)含量的方法，为全面评价和控制续断的质量提供科学依据。供试品溶液的制备精密称取续断药材粉末(80目，下同)约0.2g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入75％乙醇25mL，密塞，称定质量，超声处理(功率250W，频率40kHz)30min，放冷，称重量，用75％乙醇补足减失重量，摇匀，过0.22μm微孔滤膜，取续滤液，即得。色谱条件：采用HPLC测定，色谱条件为Venusil HILIC色谱柱(4.6mm×250mm，5μm)，流动相乙腈(A)-0.1％磷酸水溶液(B)梯度洗脱(0-20min，95％A；20-40min，95％-87％A；40-64min，87％-84％A；64-65min，84％-78％A；65-80min，78％-77％A)，流速1.0mL·min^-1，柱温30℃，进样量10μL，检测波长235nm和212nm。

现有技术“HPLC同时测定续断中7种成分的含量”存在以下缺陷：①在超声提取之前未经过浸泡，有效成分不能充分提取；②提取溶剂是75％乙醇，浓度较高造成提取溶剂的浪费；③梯度洗脱程序耗时长，造成检测分析成本增高；④未利用HPLC-ESI-MS技术对续断样品中7个化合物结构进行确认，不能全面而精确的对续断药材进行组分化合物评价。

现有技术中，申请号：CN201710984069.6；发明名称：一种续断发汗炮制方法；包括如下步骤：1)将新鲜采挖的续断地下根进行冲洗除杂，使表面无泥沙后晾干至表面无水分；2)将晾干的续断置于60～80℃条件下干燥；3)将干燥后的续断经回润法使其含水量达到30～50％；4)将经回润后的续断在20～30℃条件下密闭堆置48～96h，至续断变柔软，续断的内外部变色；5)将发汗后的续断置于60～80℃条件下干燥24～48h，使其含水量为10％以内即可。该发明通过密闭堆置发汗使续断内部的水分外渗，有利于续断从内到外整体干燥，而不是外干内湿；经本发明续断发汗炮制方法处理后续断的有效化学成分(川续断皂苷Ⅵ)含量相较于现有未发汗的续断最高可提高17.5％。