[发明专利]一种新型真皮基质脱细胞方法

权利要求书

1.一种新型真皮基质脱细胞方法，其特征在于：包括以下步骤：

⑴脱细胞前结构稳定剂的浸泡：

a含结构稳定剂的PBS缓冲液的配制：将PBS溶液与结构稳定剂室温100-150rpm震荡混匀5-15min；

b将真皮基质置于上述步骤a配置的混合液中，2-8℃，低压浸泡20min-2h，低压压力为200-500Pa，浸泡比例为溶液体积：真皮基质湿重＝1-3:1(w/v)；

⑵脱细胞过程：

a含有结构稳定剂的脱细胞溶液的配制：将脱细胞溶液与结构稳定剂室温80-200rpm震荡混匀15-30min；

b将真皮基质置于上述⑵a配制的脱细胞混合液中，2-8℃，80-200rpm震荡处理4-6h，处理比例为混合液体积：真皮基质湿重＝5-10:1(w/v)；

c将步骤⑵b处理后的真皮基质置于⑵a配制的脱细胞溶液中，2-4℃，超声高压处理30-60min，超声功率20-40Hz，压强为200-500MPa，处理比例为混合液体积：真皮基质湿重＝1-3:1(w/v)；

⑶等渗清洗：将真皮基质置于⑴a配制的含有结构稳定剂的PBS缓冲液中，2-8℃，80-150rpm震荡处理24-48h，处理比例为混合液体积：真皮基质湿重＝10-20:1(w/v)。

2.根据权利要求1所述的一种新型真皮基质脱细胞方法，其特征在于：所述的结构稳定剂为丝素蛋白、甘露醇、甘氨酸、精氨酸、蔗糖中的两种或三种。

3.根据权利要求2所述的一种新型真皮基质脱细胞方法，其特征在于：所述结构稳定剂组分的质量浓度为：

丝素蛋白：5％-20％

甘露醇：1％-3％

甘氨酸：0.5％-3％

精氨酸：0.5％-3％

蔗糖：1％-3％。

4.根据权利要求1所述的一种新型真皮基质脱细胞方法，其特征在于：所述的脱细胞试剂为酶类或表面活性剂。

5.根据权利要求4所述的一种新型真皮基质脱细胞方法，其特征在于：所述酶类脱细胞试剂为为胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、胃蛋白酶、无花果蛋白酶、磷脂酶A2、核酸酶、Dispase中的一种或多种。

6.根据权利要求4所述的一种新型真皮基质脱细胞方法，其特征在于：所述表面活性剂为Triton X-100、CHAPS、SDS、DCA中的两种或三种。

7.根据权利要求6所述的一种新型真皮基质脱细胞方法，其特征在于：表面活性剂浓度为0.01％-2％。