[发明专利]一种近红外光谱快速检测精子浓度的方法

说明书

本发明公开了一种近红外光谱快速检测精子浓度的方法，包括以下步骤：试管收集精液样品，室温环境下精液自然液化；吸取已经液化的精液至经去静电和无菌处理的玻片上，而后放置检测装置中；将预热完成的光源与光谱仪通过一分三的光纤连接，其后将光纤角度固定放置检测装置中对玻片进行不同情况照射，设置光谱积分时间，光谱波段，获取精子的光谱数据。本发明利用不同照射情况的下的光谱数据，计算出精子吸光度，从而评估精子浓度情况，本发明可以有效的评估不同男性个体的生育力，明确个体精液质量变化情况，指导健康男性选择最佳的同房时机，提高妊娠可能性。

技术领域

本发明属于精子浓度检测方法领域，具体涉及一种近红外光谱快速检测精子浓度的方法。

背景技术

近年来，不育是男科门诊常见疾病,目前认为不育不仅是个人问题,已逐渐成为全球性的公共社会问题,是许多国家生殖健康服务的重要内容之一。不孕不育夫妇中约20%的不育症完全是由男方原因引起,30%-40%是由男女双方原因引起,男方因素几乎占不育原因的一半。临床上，对于男性生育评估的首选常规检查为精液常规检查，精液常规检查主要是利用计算机辅助评估、分析精液中精子的浓度，活力，及形态等参数。

其中，每次射精时精子的总数和精子浓度均与妊娠的时间及妊娠率有关，可通过其预测受孕。此推论已为生殖率与精子总数之间关系的诸多资料所证明。每次射精时精液体积检测相对容易，因此，每次射精时精子的数量，常通过检测精液精子密度来推算（精子总数=精液体积*精液浓度）。所以简便而准确的测量每次射精时精子浓度对于评估男性生育力及预测妊娠可能性非常重要。

目前测量精子浓度的“金标准”方法为“Neubauer改良的血细胞计数器法”，需将精液与加入固定剂的稀释液混合，再用稀释后的精液充填血细胞计数器的计数池，通过人工计数的方式来计算每个计数池中精子数量，最终推算精液浓度。Neubauer改良的血细胞计数器法操作过程繁杂，实验误差较难控制，且其结果通过人工计数的方式获得，必须由有经验的检验者进行，难以在临床上大范围推广。

近红外光谱作为多种体液检测手段，已广泛用于生物医学及法医鉴定领域。该技术在中等光子能量下主要是非侵入性和非破坏性的，并且在体外和体内起作用在广泛的环境条件下。它提供了有关大分子（如DNA和蛋白质）的构象，组成和分子间相互作用的详细信息。精子细胞作为单配体细胞，其主要由核酸和蛋白质组成，基于核酸和蛋白质对光谱不同波长吸收率不同，可以初步检测精液中是否存在精子细胞，以及通过吸收光谱的峰值推算精液中精子细胞的数量。基于以上理论，本发明开展基于显微近红外的非标记的精液常规检查，对于临床上精子质量的客观评估和预测男性生育力具有十分重要的意义。

发明内容

本发明就是为了克服现有技术中存在的缺点而提出的，其目的是提供一种近红外光谱快速检测精子浓度的方法。

本发明是通过以下技术方案实现的：

一种近红外光谱快速检测精子浓度的方法，包括以下步骤：

S1：使用经过去静电和无菌处理的容器收集精液样本，室温环境下静置，使精液自然液化；

S2：将液化的精液搅拌均匀并抽取精液，滴到去静电处理的特质载玻片口上，精液因虹吸被吸入玻片内，形成均匀的单层精液样本层；

S3：光源通电预热，将光纤接到光谱仪与光源上，光纤另一端接到检测装置的对应接口上，光谱仪连接PC机；

S4：光谱仪的积分区间范围设置在1000ms-5500ms；对于每个精液样本，均分别执行下面S5~S7的步骤；

S5：在一定环境因素的条件下，在样本承载台上放置空载玻片，旋转样本承载台对空载玻片进行特定角度照射，将反射光通过固定于检测装置出光口的光纤接收后，数据图谱将显示在PC机上，重复采集20组数据；