[发明专利]一种新型冠状病毒检测试剂盒及其制备方法和检测方法

权利要求书

1.一种新型冠状病毒检测试剂盒，其特征在于，包括

手柄区，其由吸水纸制备而成；

测试区，其以硝酸纤维素膜为载体，硝酸纤维素膜由上至下分别包被抗兔IgG多

克隆抗体、抗人IgG抗体、抗人IgM抗体；

金垫：其包括聚酯膜，聚酯膜上涂抹有胶体金与新冠病毒重组抗原结合形成的

金标结合物；或者，金垫包括聚酯膜，聚酯膜上涂抹有胶体金与兔IgG结合

形成的金标结合物；

样品垫，其包括缓冲溶液浸泡过的玻璃纤维；

滤血膜，其贴在所述样品垫上。

2.根据权利要求1所述的新型冠状病毒检测试剂盒的制备方法，其特征在于：

所述测试区的制备步骤包括：使用三头的连续划膜机将阴性液、T1阳性液、T2阳性液同时包被到硝酸纤维素膜上，将膜放到37℃的恒温环境中干燥18-24h，得到测试区。

3.根据权利要求2所述的新型冠状病毒检测试剂盒的制备方法，其特征在于：

所述阴性液由抗兔IgG多克隆抗体经CR-1溶液稀释而成；

所述T1阳性液由抗人IgG抗体经CR-2溶液稀释而成；

所述T2阳性液由抗人IgM抗体经CR-2溶液稀释而成。

4.根据权利要求3所述的新型冠状病毒检测试剂盒的制备方法，其特征在于：

所述CR-1溶液包括10mM磷酸盐缓冲溶液（PBS）、质量体积比为0.2%-0.8%蔗糖、体积比为0.01%-0.05% 防腐剂Proclin 300；

所述CR-2溶液包括10mM磷酸盐缓冲溶液（PBS）、质量体积比为0.2%-0.8%蔗糖、质量体积比为0.1%-0.4%牛血清白蛋白（BSA）、体积比为0.01% -0.05% 防腐剂Proclin 300。

5.根据权利要求1所述的新型冠状病毒检测试剂盒的制备方法，其特征在于：

所述金垫的制备包括胶体金制备、金标结合物制备和金垫制备；

所述胶体金制备的步骤包括：质量体积比万分之二的氯金酸水溶液加热煮沸，

加入质量体积比万分之1.8的柠檬酸三钠，待溶液变色后，持续煮沸5min，停止

加热，冷却后定容至原体积，得到胶体金溶液；

所述金标结合物制备步骤包括：在胶体金溶液中加入体积比为0.5%的LR-1

溶液，充分搅拌混匀；加入9-12µg/ml的新冠病毒重组抗原/5-7µg/ml的兔IgG，

充分搅拌混匀；加入体积比为2%的LR-2溶液，充分搅拌混匀；离心去上清，

沉淀中加入10%的LR-3溶液进行复溶，混合后即得到金标结合物，测OD值，

OD值为60d-100d，冷藏保存；

或者，所述金标结合物制备步骤包括：在胶体金溶液中加入体积比为0.5%的LR-1

溶液，充分搅拌混匀；加入5-7µg/ml的兔IgG，充分搅拌混匀；加入体积比为2%

的LR-2溶液，充分搅拌混匀；离心去上清，沉淀中加入10%的LR-3溶液进行复

溶，混合后即得到金标结合物，测OD值，OD值为60d-100d，冷藏保存；

所述金垫制备的步骤包括：金标结合物用LR-3溶液稀释至OD值为5-15d，在聚酯

膜涂抹12ml金标结合物，正反面涂抹均匀；然后放到37℃的恒温环境中干燥

18-24h，得到金垫。

6.根据权利要求5述的新型冠状病毒检测试剂盒的制备方法，其特征在于：

所述LR-1溶液包括0.2M K₂CO₃；

所述LR-2溶液包括质量体积比为8%-12%牛血清白蛋白（BSA）；

所述LR-3溶液包括质量体积比为0.4%-0.8%三羟甲基氨基甲烷（Tris）、质量体积比为3%-5% 蔗糖、质量体积比为0.3%-0.7%牛血清白蛋白（BSA）、质量体积比为0.1%-0.4%干酪素（Casein）、体积比为0.01% -0.05% 防腐剂Proclin300，调 pH=8。