[发明专利]一种用于高效液相色谱仪检测丙戊酸血药浓度的衍生物的制备方法

说明书

本发明公开了一种用于高效液相色谱仪检测丙戊酸血药浓度的衍生物的制备方法，是将催化剂、丙戊酸衍生化试剂置于密闭玻璃管中，采用一锅煮合成法制备得到的衍生物。本发明提供的一种用于高效液相色谱仪检测丙戊酸血药浓度的衍生物的制备方法，利用超声化学原理，加速分子运动，促进衍生化反应，提高反应效率，缩短反应时间；采用“一锅煮”的方法，简化衍生化反应后处理步骤，无需蒸干或氮气吹干再加流动相溶解进样，可减少因挥发或氮气吹干导致的衍生化产物的损失；而采用衍生化结束后冰浴冷却吸取下层溶液直接进样，后处理方法简便，同时减少误差，为高效液相色谱法测定丙戊酸血药浓度提供一种高效、快捷、方便的衍生化方法。

技术领域

本发明涉及有机化学技术领域，具体涉及一种用于高效液相色谱仪检测丙戊酸血药浓度的衍生物的制备方法。

背景技术

丙戊酸钠是一种常用广谱抗癫痫药物，因患者个体差异较大，治疗窗口较窄，服用剂量过大易造成毒副作用，需要进行常规血药浓度检测，目前丙戊酸有效血药治疗浓度为50-100mg/L，若血药浓度超过100mg/L时，毒副作用会显著增强。癫痫患者因需要长期服用该药，而且临床医生会随着患者症状变化、体重变化尤其是儿童会根据体重变化调整给药剂量，因此需要监测血药浓度，为调整给药剂量提供依据，对指导临床个体化给药具有重要意义。

目前可检测丙戊酸血药浓度的方法较多，常用的有酶联免疫法、荧光偏振免疫分析发、液相色谱串联质谱法、气相色谱法以及高效液相色谱法等，各种方法都有优缺点。而高效液相色谱法监测丙戊酸血药浓度，相对经济，但也存在丙戊酸衍生化过程复杂、反应时间长、反应结束后常使用氮气吹干或挥干不宜控制，易使合成的衍生物随着氮气带走造成损失，影响检测结果准确性等缺点。

发明内容

本发明的目的就是针对上述现有技术中的缺陷，提供了一种利用超声化学原理，加速分子运动，促进衍生化反应，提高反应效率，缩短反应时间，采用“一锅煮”方法的用于高效液相色谱仪检测丙戊酸血药浓度的衍生物的制备方法。

为了实现上述目的，本发明提供的技术方案为：一种用于高效液相色谱仪检测丙戊酸血药浓度的衍生物的制备方法，是将催化剂、丙戊酸衍生化试剂置于密闭玻璃管中，采用一锅煮合成法制备得到的衍生物。

进一步的，上述的一种用于高效液相色谱仪检测丙戊酸血药浓度的衍生物的制备方法，包括以下步骤：精密量取25-200μl质控血清或样本血清，加入内标溶液25-100μl，再加入1-5mol/L硫酸溶液50-400μl，混合均匀，再加入正己烷1-4ml涡旋振摇1-2min,并在3000-5000r/min离心机离心5min，吸取上清液，加入乙腈200-800μl、催化剂25-70μl，衍生化试剂乙腈溶液50-200μl放置试管中，密闭混合均匀，放在20-70℃超声波水浴恒温振荡器中，在试管密闭条件下反应5-30min反应结束，下层液体即为所述衍生物，取下层液体直接进行高效液相色谱仪进样检测即可。

进一步的，上述的一种用于高效液相色谱仪检测丙戊酸血药浓度的衍生物的制备方法，所述质控血清或样本血清中，丙戊酸浓度为1-250μg/ml。

进一步的，上述的一种用于高效液相色谱仪检测丙戊酸血药浓度的衍生物的制备方法，所述内标溶液为正庚酸的正己烷溶液。

进一步的，上述的一种用于高效液相色谱仪检测丙戊酸血药浓度的衍生物的制备方法，所述催化剂为三乙胺。

进一步的，上述的一种用于高效液相色谱仪检测丙戊酸血药浓度的衍生物的制备方法，所述衍生化试剂乙腈溶液为2，4′-二溴苯乙酮乙腈溶液。