[发明专利]一种液相色谱法分离测定右美沙芬与左美沙芬的方法

说明书

一种液相色谱法分离测定右美沙芬与左美沙芬的方法。本发明公开了一种通过高效液相色谱法测定右美沙芬与左美沙芬的方法，所述测定方法采用表面涂敷有纤维素—三(4－甲基苯甲酸酯)的硅胶为填充剂的色谱柱，其检测条件如下：色谱条件：色谱柱为菲罗门Chiral MJ(2)5μ(4.6mm×250mm，5μm)，以正己烷‑乙醇‑二乙胺为流动相进行洗脱，正己烷‑乙醇‑二乙胺的具体比例为90:10:0.1，检测波长285nm，柱温30℃，流动相速度0.5mL/min。本发明方法精密度高，重复性好，回收率高，可以广泛用于不同来源的右美沙芬原料药及其对应制剂的质量检测。

技术领域

本发明属于药物分析领域，具体涉及通过高效液相色谱法分离测定右美沙芬与左美沙芬的方法。

背景技术

右美沙芬是吗啡类左吗喃甲基醚的右旋异构体，通过抑制延髓咳嗽中枢而发挥中枢性镇咳作用。其镇咳强度与可待因相等或略强。无镇痛作用，长期应用未见耐受性和成瘾性。治疗剂量不抑制呼吸。口服吸收好，15～30分钟起效，作用可维持3～6小时，血浆中原型药物浓度很低。右美沙芬化学名为3-甲氧基-17-甲基-(9α,13α,14α)吗啡喃(3-methoxy-17-methyl-(9α,13α,14α)-Morphinan)。

右美沙芬的的左旋异构体(左美沙芬)是比吗啡的成瘾性还强3倍的中枢性镇痛剂，因此，出于医学以及法律上的目的，急需一种分离测定右美沙芬与左美沙芬的方法，目前仅美国药典通过液相方法测定右美沙芬中左美沙芬的含量，但该方法的固定相色谱柱为L88，Astec Chirobiotic-V2(4.6mm×25cm,5μm)，在实际中并不常用，该方法缺乏一定普适性。

右美沙芬和左美沙芬结构式和化学式等信息如下表1所示：

表1

Tedesco D等人发表了《Determination of dextromethorphan andlevomethorphan in seized heroin samples by enantioselective HPLC andelectronic CD》，该文献公开了一种使用液相色谱法分离检测右美沙芬与左美沙芬的方法，其在于使用对映选择性HPLC-DAD-CD法，固定相为Chiralcel OJ column(250mm×4.6mmI.D.)，以正己烷-2-异丙醇-二乙胺为流动相，具体比例为50∶50∶0.1、70∶30∶0.1、85∶15∶0.1(V/V/V)，右美沙芬和左美沙芬的测试浓度均为1mg/mL。但发明人发现，该方法在右美沙芬高浓度的情况下，不能有效分离分析右美沙芬与左美沙芬，线性范围较低，分离度不高。

Kim S C等人发表了《Simultaneous analysis of d-3-methoxy-17-methylmorphinan and l-3-methoxy-17-methy lmorphinan by high pressure liquidchromatography equipped with PDA》，该文献公开了一种使用液相色谱法分离检测右美沙芬与左美沙芬的方法，采用Chiral CD-Ph(3.6mm×250mm，5μm)色谱柱；流动相为乙腈∶甲醇∶0.5M NaClO₄(30∶25∶45％)；检测波长290nm；流速0.7mL·min^-1，右美沙芬和左美沙芬的保留时间分别为17.80±0.81(％R.S.D)和18.99±0.84(％R.S.D)。

Li,Li等人发表了《Direct enantiomer determination of methorphan byHPLC-MS and SFC-MS》，该文献公开了一种使用超液相色谱法分离检测右美沙芬与左美沙芬的方法，采用Chirobiotic V2(2.1×250mm,5μm)色谱柱，流动相：甲醇∶氨水∶醋酸钠(100∶0.02∶0.1，V/V/V)。