[发明专利]Plackett-Burnman联合响应面法优化提取杠板归槲皮素的方法

权利要求书

1.Plackett-Burnman联合响应面法优化提取杠板归槲皮素的方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)原料处理：将干燥的杠板归粉碎，得杠板归粉末；

(2)提取：向杠板归粉末中加入乙醇浸泡；浸泡后，水浴回流提取，过滤，获得提取液；

(3)Plackett-Burman实验：以槲皮素提取量为指标，运用Minitab 19进行PBD试验，试验设计提取杠板归槲皮素的浸泡时间、乙醇体积分数、溶剂量、温度、提取时间、提取次数，筛选出杠板归槲皮素提取的主要影响因子；

(4)BBD实验：依据Plackett-Burman实验结果，确定乙醇体积分数、溶剂量、提取时间为主要影响因子；以主要影响因子为响应面设计的因素，以槲皮素提取量为响应值，建立响应值与各因素之间的二次多元回归模拟方程；

(5)模型分析：对二次多元回归模拟方程进行方差分析和显著性分析，根据对回归模拟方程失拟的P值检验失拟是否显著，确定二次回归模方程是否适当，根据显著性检验，确定回归方程是否显著；

(6)提取条件确定：根据二次多元回归方程进行绘图，分析自变量和响应值的关系，得到回归方程的响应面图，从而得到杠板归槲皮素的最佳提取条件。

2.如权利要求1所述的Plackett-Burnman联合响应面法优化提取杠板归槲皮素的方法，其特征在于，所述响应值与各因素之间的二次多元回归模拟方程：y＝0.32－0.0025x₁+0.0001x₂+0.015x₃+0.0075x₁x₂－0.0075x₁x₃+0.0125x₂x₃－0.0322x₁²－0.0022x₂²－0.0173x₃²；其中x₁为乙醇体积分数，x₂为溶剂量，x₃为提取时间，y为槲皮素提取量。

3.如权利要求1所述的Plackett-Burnman联合响应面法优化提取杠板归槲皮素的方法，其特征在于，所述步骤(6)，杠板归槲皮素的最佳提取条件为：25倍59.92％乙醇浸泡24h，60℃下回流提取3.4h，提取2次。

4.一种杠板归槲皮素的提取方法，其特征在于，提取过程为：将干燥的杠板归粉碎至60目，得到杠板归粉末；向杠板归粉末加入15-25倍55％-65％乙醇浸泡24h，60℃水浴回流提取2.5-3.5h，提取2次；合并提取液，过滤，烘干并粉碎，即得杠板归槲皮素。

5.如权利要求4所述的杠板归槲皮素的提取方法方法，其特征在于，所述提取过程为：将干燥的杠板归粉碎至60目，得到杠板归粉末；向杠板归粉末加入25倍59.92％乙醇浸泡24h，60℃水浴回流提取3.4h，提取2次合并提取液，过滤，烘干并粉碎，即得杠板归槲皮素。

6.一种如权利要求要求4或5所述提取方法所制得的杠板归槲皮素在制备治疗畜禽细菌性疾病药物中的应用。

7.如权利要求6所述的应用，其特征在于，畜禽细菌性疾病是由大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、沙门氏菌引起的。