[发明专利]用于检测新型冠状病毒SARS-CoV-2的试纸条、传感器及其制备与应用有效
申请号: | 202010329649.3 | 申请日: | 2020-04-23 |
公开(公告)号: | CN111505284B | 公开(公告)日: | 2023-05-02 |
发明(设计)人: | 黄昱;吴茳铃;谢远扬;李吉业;李文明;崔洪亮 | 申请(专利权)人: | 中国科学院重庆绿色智能技术研究院;重庆医科大学 |
主分类号: | G01N33/569 | 分类号: | G01N33/569;G01N33/558;G01N33/533 |
代理公司: | 上海光华专利事务所(普通合伙) 31219 | 代理人: | 代玲 |
地址: | 400714 *** | 国省代码: | 重庆;50 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 用于 检测 新型 冠状病毒 sars cov 试纸 传感器 及其 制备 应用 | ||
1.一种检测新型冠状病毒SARS-CoV-2的比色法试纸条,所述比色法试纸条包括底板和沿层析方向依次设置在底板上的样品垫、结合垫、检测垫和吸收垫,所述检测垫上设有检测线和控制线,其特征在于,所述结合垫上喷涂有分别由检测探针DetProbe C1和检测探针DetProbe C2修饰的MoS2@Au纳米球,所述纳米球能结合新型冠状病毒;所述检测垫检测线处先后喷涂有链霉亲和素和探针T-DNA,所述检测垫控制线处先后喷涂有链霉亲和素和探针C-DNA;
所述检测探针DetProbe C1和检测探针DetProbe C2均由polyA方式修饰,所述探针T-DNA和探针C-DNA均由生物素修饰;
所述检测探针DetProbe C1和探针C-DNA的碱基序列,除采用polyA和生物素修饰部分外,其余碱基序列互补;所述检测探针DetProbe C2和探针T-DNA的碱基序列,除采用polyA和生物素修饰部分外,其余碱基序列完全相同;
所述检测探针DetProbe C1的碱基序列为:5’-AAAAA-GCTGGATGTCGCTTACGACAATATTCCTTAGGGG
CACCGCTACATTGACACATCCAGC-3’;
和/或,所述检测探针DetProbe C2的碱基序列为:
5’-AAAAA-GCTGGATGTCACCGGATTGTCGGACATCGGATTGTCTGAGT
CATATGACACATCCAGC-3’;
和/或,所述探针T-DNA的碱基序列为:
5’-Biotin-GCTGGATGTGTCATATGACTCAGACAATCCGATGTCCGACAAT
CGGGAGACATCAGC-3’;
和/或,所述探针C-DNA的碱基序列为:
5’-Biotin-GCTGGATGTGTCAATGTAGCGGTGCCCCTAAGGAATATTGTCG
TAAGCGACATCCAGC-3’。
2.一种如权利要求1所述的检测新型冠状病毒SARS-CoV-2的比色法试纸条的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:
(1)MoS2@Au NP-DetProbe C2复合物的制备:
①在MoS2量子点溶液中加入聚乙烯吡咯烷酮,搅拌反应,再加入氯金酸溶液,继续搅拌反应,然后离心取上清液,超声清洗获得MoS2量子点为核,金为壳的MoS2@Au纳米球溶液;
②用D-PBS缓冲液将检测探针DetProbe C1配制成DetProbe C1溶液,将DetProbe C1溶液、三(2-羧乙基)膦盐酸盐溶液加入到MoS2@Au纳米球溶液中,搅拌反应,然后加入三磷酸腺嘌呤脱氧核苷酸溶液,继续搅拌反应,反应结束后将其冷藏,待其稳定后离心,取沉淀用D-PBSB溶液清洗后获得MoS2@Au NP-DetProbe C1复合物;
(2)MoS2@Au NP-DetProbe C2复合物的制备:按照步骤(1)的方法,将步骤②中的检测探针DetProbe C1替换为检测探针DetProbe C2,即可获得MoS2@Au NP-DetProbeC 1复合物;
(3)将MoS2@Au NP-DetProbe C1复合物和MoS2@Au NP-DetProbe C2复合物喷涂在结合垫上;
(4)将T-DNA溶液与链霉亲和素溶液混匀后于室温下培养,然后用超滤离心管离心,取内管中溶液固定在检测垫检测线处;将C-DNA溶液与链霉亲和素溶液混匀后于室温下培养,然后用超滤离心管离心,取内管中溶液固定在检测垫控制线处;
(5)将样品垫、结合垫、检测垫和吸收垫顺次搭接在底板上,获得比色法试纸条。
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