[发明专利]一种不含免疫源性的脐带间充质干细胞冻存液及方法

权利要求书

1.一种不含免疫源性的脐带间充质干细胞冻存液，其特征在于，包括脐带血自体血清、右旋糖苷-40、二甲基亚砜、无免疫源性的人重组抗冻蛋白AFP。

2.根据权利要求1所述的不含免疫源性的脐带间充质干细胞冻存液，其特征在于，所述脐带血自体血清、右旋糖苷-40、二甲基亚砜按照体积占比依次为：60％-90％、2％-15％、2％-18％；无免疫源性的人重组抗冻蛋白AFP的质量与脐带血自体血清体积比为0.1。

3.根据权利要求2所述的不含免疫源性的脐带间充质干细胞冻存液，其特征在于，所述脐带血自体血清、右旋糖苷-40、二甲基亚砜按照体积占比依次为：70％-85％、3％-13％、4％-15％。

4.根据权利要求2所述的不含免疫源性的脐带间充质干细胞冻存液，其特征在于，所述脐带血自体血清、右旋糖苷-40、二甲基亚砜按照体积占比依次为：80％、10％、10％。

5.一种干细胞冻存方法，其特征在于，包括以下步骤：

步骤一：按权利要求1-4任一所述的配方量配置得到冷冻液A；

步骤二：从培养基中分离出附着有干细胞的微载体，将微载体加入到冷冻液A中，得到细胞悬浮液B；

步骤三：将细胞悬浮液B放置于低温处理24小时，得到冻存细胞C；

步骤四：将冻存细胞C放入液氮中保存。

6.根据权利要求5所述的干细胞冻存方法，其特征在于，步骤三中的低温处理至少为-80℃的低温。

7.根据权利要求5所述的干细胞冻存方法，其特征在于，步骤三中的低温处理为持续降温，在前6小时内将温度从室温匀速降低至目标温度，然后维持该目标温度至24小时。