[发明专利]一种筛选产油丝状真菌的方法在审
| 申请号： | 202010336902.8 | 申请日： | 2020-04-26 |
| 公开（公告）号： | CN111662827A | 公开（公告）日： | 2020-09-15 |
| 发明（设计）人： | 郝光飞;赵山山 | 申请（专利权）人： | 河北工程大学 |
| 主分类号： | C12N1/14 | 分类号： | C12N1/14;C12N1/02;C11B1/04;C11B1/10;C12R1/77;C12R1/645 |
| 代理公司： | 南京禹为知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 32272 | 代理人： | 王晓东 |
| 地址： | 056038 河*** | 国省代码： | 河北;13 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 筛选 产油 丝状 真菌 方法 | ||
1.一种适用于产油丝状真菌的氯化三苯基四氮唑PDA培养基，其特征在于：包括，
配置马铃薯琼脂培养基；
加入三氯生和氯化三苯基四氮唑，使得马铃薯琼脂培养基含有5mg/L三氯生和0.5g/L氯化三苯基四氮唑。
2.如权利要求1所述的适用于产油丝状真菌的氯化三苯基四氮唑PDA培养基，其特征在于：所述配置马铃薯琼脂培养基，其为采用糖、马铃薯提取物、琼脂，去离子水配置，115℃下灭菌20分钟；
按质量份数计，所述糖类20份，所述马铃薯提取物4份，所述琼脂20份，所述去离子水900份。
3.如权利要求1所述的适用于产油丝状真菌的氯化三苯基四氮唑PDA培养基，其特征在于：所述加入三氯生和氯化三苯基四氮唑，其为加入三氯生和氯化三苯基四氮唑溶液，所述糖类包括葡萄糖、蔗糖、低聚木糖、低聚果糖、水苏糖中的一种或几种。
4.一种利用权利要求1～3任一所述的氯化三苯基四氮唑PDA培养基筛选产油丝状真菌的方法，其特征在于：取土壤于无菌水中，震荡1～3h后稀释菌液；
将所述菌液涂布在氯化三苯基四氮唑PDA培养基上，分离产油丝状真菌和/或产油丝状真菌孢子，纯化即得菌体。
5.如权利要求4所述的筛选产油丝状真菌的方法，其特征在于：经检测，所述产油丝状真菌包括球毛壳霉和/或镰刀霉菌。
6.一种产油丝状真菌脂质的提取方法，其特征在于：培养产油丝状真菌，冷冻干燥，得到冻干菌体；
粉碎所述冻干菌体，加入盐酸进行震荡，冻融两次后冷却至室温，加入脂肪酸内标C15:0、甲醇及氯仿，振荡5min后置于离心机3000g离心3min，收集氯仿层。
7.如权利要求6所述的产油丝状真菌脂质的提取方法，其特征在于：所述冻融其为在80℃、1h和-80℃、15min条件下进行。
8.如权利要求6或7所述的产油丝状真菌脂质的提取方法，其特征在于：所述甲酯化为在60℃进行甲酯化3h，每隔半小时振荡一次。
9.如权利要求1～5或7任一所述的产油丝状真菌脂质的提取方法，其特征在于：产油丝状真菌干菌体得率大于12.5g/L，油脂得率大于3.g/L，油脂含量大于24.5％。
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