[发明专利]一种高效液相色谱串联质谱法测定神经甾体类激素的方法

权利要求书

1.一种高效液相色谱串联质谱法测定神经甾体类激素的方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)标准溶液的配制：称取神经甾体标准品配制成标准溶液；

(2)样品前处理：取待测样品，称重后加入乙腈和MT，涡旋并离心，取上清液；将上清液加入至预先用乙腈清洗过的EMR固相萃取小柱中过滤，得净化后的样品溶液；

(3)高效液相色谱-串联质谱分析：利用高效液相色谱-串联质谱仪分别对标准溶液和样品溶液进行检测分析。

2.根据权利要求1所述的高效液相色谱串联质谱法测定神经甾体类激素的方法，其特征在于，步骤(3)中，高效液相色谱条件为：

XDB-C₁₈色谱柱；流动相A为乙酸铵溶液，流动相B为甲醇；采用梯度洗脱模式：

0-2.5min时，流动相A:流动相B＝40％:60％

2.5-5.5min时，流动相A:流动相B＝40％:60％-60％:95％

5.5-7.0min时，流动相A:流动相B＝5％:95％

7.0-7.1min时，流动相A:流动相B＝5％:40％-95％:60％

7.1-10.0min时，流动相A:流动相B＝40％:60％

流速0.5mL/min,进样体积10μL,柱温45℃。

3.根据权利要求1所述的高效液相色谱串联质谱法测定神经甾体类激素的方法，其特征在于，步骤(3)中，质谱条件为：

离子源：电喷雾离子源；

扫描方式：正电子；

扫描模式：多反应离子监测；

离子化电压：5500V；

气帘气:241.33kpa；

喷雾气:413.7kPa；

辅助加热气：413.7kPa；

离子源温度：100℃。

4.根据权利要求1-3任一所述的高效液相色谱串联质谱法测定神经甾体类激素的方法，其特征在于，所述步骤(2)中，MT的浓度为1μg/mL。

5.根据权利要求1-3任一所述的高效液相色谱串联质谱法测定神经甾体类激素的方法，其特征在于，所述步骤(2)中，离心的条件为15000r/min转速离心4分钟。

6.根据权利要求1-3任一所述的高效液相色谱串联质谱法测定神经甾体类激素的方法，其特征在于，所述步骤(1)中，神经甾体标准品包括脱氧皮质酮、去氢表雄酮、甲基睾酮、孕烯醇酮、孕酮和别孕烯醇酮中的至少一种。